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处理时，观察到的类似累加效应（参见图的；有关该实验的更详细版本，包括额外的）突变体，参见补充图）。当作为单一、或达沙替尼联合使用时，以剂量依赖性方式降低表达的a/细胞中的rc和磷酸化（图；补充图）。对达沙替尼和厄洛替尼联合治疗有放射学反应的临床试验受试者中激酶结构域突变的观察最近报道了两项达沙替尼早期临床试验，其中晚期肺癌受试者接受达沙替尼或达沙替尼和厄洛替尼联合治疗,。名 肺鳞状细胞癌受试者中的一名在接受达沙替尼和 厄洛替尼联合治疗时，肿瘤大小显着缩小；与研究中对治疗有反应且患有腺癌的其他受试者不同，没有的证据在受试者中发现了突变。该患者是一位​​岁的白人女性，有年每天吸烟三分之一包的吸烟史，并在诊断出肺癌前一年戒烟。她被发现日本短信网关患有左下叶期（肿瘤，；淋巴结，；转移，）鳞状细胞癌，并接受每周一次 卡铂和紫杉醇初步治疗，同时接受y的放射治疗，获 得完全缓解。然而，大约一年后，疾病在放射野内进展，并开始使用标准剂量的卡铂和紫杉醇治疗，但没有反应。然后，她开始按照方案进行达沙替尼和厄洛替尼联合治疗。近个月后，重新分期计算机断层扫描扫描显示肿瘤缩 美国在线电子邮件列表 小，患者症状有所改善（呼吸困难和咳嗽得到缓解；图和）。她继续接受治疗方案个月，直到由于治疗引起的空腔疾病和胸腔积液而不得不停止治疗。图图患有突变的患者接受达沙替尼加厄洛替尼治疗后的放射学反

此；在转化时间或不依差异（补充图）。激酶死亡的转基因（）不支持a/细胞的独立生长（补充图）。尽管用效力较弱的抑制剂伊马替尼培养不会导致表达突变的a/细胞显着死亡，但与在存在下生长的细胞相比，用达沙替尼培养会导致所有表达突变体的细胞系死亡，突变体的平均为n，对照为μ（图；补充图）。第三代bl抑制剂也 更具靶点特异性的型抑制剂尼洛替尼和伊马 替尼更有效，我们试图测试达沙替尼在该系统中的效力是否可能是由于这些影响达沙替尼对以外的激酶的作用。先前已被证明需要rc才能发挥最批量短信孟加拉国大激酶活性，并且我们观察到，在缺乏的情况下，表达突变体的a/细胞中磷酸化rc的水平得以维持（补充图）。为了确定突变在a/细胞中赋予独立增殖的能力是否可能依赖于和rc活性，我们处理了表达与一起使用，是一种高度选择性的rc家族激酶抑制剂，与本 文中描述的其他抑制剂相比，其对的 活性最小（体外d，n；补充表；参考文献）。与尼洛替尼治疗一样，对不依赖的表达a/细胞的增殖有一定影响（补充图和）。然而，当表达突变的a/细胞在n尼罗替尼中生长时，该浓度对野生型a/细胞或表达的a/细胞的增殖几 美国在线电子邮件列表 乎没有影响突变（补充图），添加导致表达的a/细胞增殖显着减少；这一发现表明，突变的a/细胞在没有的情况下生长的能力可能需要和rc家族激酶的协调活性，从而为达沙替尼在该系统中的效力提供了可能的解

磷酸rc、磷酸、疫印迹。或达沙替尼，含或不含n；增殖是相对于平行生长的未处理细胞而言的。，用所示浓度的以及n尼罗替尼、或达沙替尼处理天的转化a/细胞的免疫印迹。第一泳道是未经处理的样品。显示的是用针对磷酸rc、磷酸、和肌动蛋白的抗体探测的免疫印迹。或达沙替尼，含或不含n；增殖是相对于平行生长的未处理细胞而言的。，用所示浓度的以及n尼罗替尼、或达沙替尼处理天的转化a/细胞的免疫 印迹。第一泳道是未经处理的样品 显示的是用针对 磷酸rc、磷酸、和肌动蛋白的抗体探测的免疫印迹。查看大图下载幻灯片突变体的异位表达会导致细胞转化，这种转化可以通过达沙替尼或联合酪氨酸激酶抑制剂治疗来阻断。，来自软琼脂测定的结果，其中将表达突变、突变或突变的成纤维细胞在存在不同浓度的达沙替尼的情况下置于软琼脂中。显示了具有的个独立样本的集落数。，仅表批量短信尼泊尔达载体或个中的个的a/细胞在天时的增殖在达沙替尼存在下生长的细胞中观察到的突变。对于载体， 对照细胞在存在的情况下生长以维持活力， 而对于突变体，所有细胞均不依赖 美国在线电子邮件列表 于，并在不存在的情况下培养。对于具有的一式三份样品，在同一时间点显示相对于未处理细胞的增殖。，表达的a/细胞与n尼洛替尼、或达沙替尼有或没有n共培养的增殖；增殖是相对于平行生长的未处理细胞而言的。、的免疫印迹转化的a/细胞用所示浓度的以及n尼洛替尼、或达沙替尼处理天。第一泳道是未经处理的样品。显示的是用针对磷酸rc、磷酸、和肌动蛋白的抗体探测的免疫印迹。由于在

每个队列的小鼠的代表性图像，以及肿瘤大小的测量结果。瘤；无法进一步分析这些小鼠。突变具有致癌性，驱动的转化对达沙替尼敏感我们检查了突变是否可以赋予致癌功能获得表型。在我们的初次和二次筛选中鉴定出的突变体子集的异位表达（nof）促进了细胞软琼脂中集落的形成（补充图）。和突变体中的集落形成最大，其水平与中功能获得性突变表达驱动的水平相当，而其余基因型中的集落形成则适中。对于突 变体，在铺板时单次施用达沙替尼即可抑制集落形成，该 突变体在我们的测定中可重复地形成最多集落（图））。达沙替尼治疗还抑制表达中突变的细胞的集落形成，与之前的报道一致，并且在稳定表达激活的突变的细胞中抑制程度较小（图；参考文献）。、）。图批量短信马来西亚图突变体的异位表达导致细胞转化，可通过达沙替尼或联合酪氨酸激酶抑制剂治疗来阻断。，软琼脂测定的结果，其中将表达突变、突变或突变的成纤维细胞在不同浓度的达沙替尼存在下铺板于软琼脂中。显示了具有的个独立样 本的集落数 仅表达载体或在达沙替尼存在下生长 的细胞中观察到的个突变之一的a/ 美国在线电子邮件列表 细胞在天时的增殖。对于载体，对照细胞在存在的情况下生长以维持活力，而对于突变体，所有细胞均不依赖于，并在不存在的情况下培养。对于具有的一式三份样品，在同一时间点显示相对于未处理细胞的增殖。，表达的a/细胞与n尼罗替尼、或达沙替尼（有或没有n）共培养的增殖；增殖是相对于平行生长的未处理细胞而言的。，用所示浓度的以及n尼罗替尼、或达沙替尼处理天的转化a/细胞的免疫印

据未显示）。我们观察到，这个sh敲低导致个突变细胞系的增殖减少，但少，在我们的增殖测定中，该细胞对伊马替尼和达沙替尼敏感。图）。增殖的减少似乎与敲低程度相关，因为用sh观察到的表型比sh更大（图），并且似乎是由细胞死亡而不是细胞周期停滞引起的（数据未显示）。为了评估观察到的敲低表型的特异性，我们在异位表达其所描述的突变形式（分别为和）的和细胞中进行了类似的实验，然后用sh敲低 内源，它针对的’非翻译区，预计不会干扰的异位表 达。我们在和中观察到的异位表达减弱了内源敲低的抗增殖作用，并且中的这种作用更为严重，这可能是由于中脱靶作用程度更大（图伊拉克短信网关）。突变与达沙替尼体内敏感性相关为了在更生理的环境中分析达沙替尼治疗的效果，我们在无胸腺裸鼠中进行了异种移植研究，其中我们向小鼠组注射了、、和细胞。细胞未在小鼠体内形成肿瘤，因此无法进一步分析。个测试系肿瘤形成后，小鼠通过口服强饲法用达沙替尼mg/kg治疗周，或用载体对照治疗。 达沙替尼治疗导致和细胞系的肿瘤大小减小，但 在中没有，这与我们的体外结果一致 美国在线电子邮件列表 （图）。图图鳞状肺癌细胞系的异种移植证明了达沙替尼的体内抗肿瘤作用。无胸腺nu/nu小鼠皮下注射、、和细胞n，并在肿瘤形成后用达沙替尼或载体治疗周。显示的是每个队列的小鼠的代表性图像，以及肿瘤大小的测量结果。注射的小鼠没有形成肿瘤；无法进一步分析这些小鼠。查看大图下载幻灯片鳞状肺癌细胞系的异种移植证明了达沙替尼的体内抗肿瘤作用。无胸腺nu/nu小鼠皮下注射、、和细胞

点未处理的细胞的增殖。显示一式三份样品的。，在中异位表达看增殖，标记为。中显示了达沙替尼存在下的天增殖。对于和，看门人突变与细胞系中发现的突变以顺式表达。，如中测量的、的增殖，细胞稳定表达sh载体，该载体靶向绿色荧光蛋白或的’sh或的编码序列sh。与第天相比，在培养天后测量增殖。显示了三次重复样品的。插图，免疫印迹显示实验中使用的细胞系中的相对水平。“”，表达sh的细胞；“”和“”是编号的目标发夹。，通过靶向’（sh）的sh敲低后，稳定表达异位的突变体和细胞系的天增殖。相对于用靶向的sh转导 的细胞，一式三份样品的增殖如图所示。的蛋白质 水平显示在下面的免疫印迹中。“”sh“，”sh的表达；和“”，sh和的表达。查看大图下载幻灯片具有突变的肺癌细胞系对针对的药物和干扰敏感。，在不同浓度的达沙替尼存在下生长天的、、和的增殖。显示相对于同一时间点未处理的细胞的短信群发缅甸增殖。显示一式三份样品的。，在中异位表达看门人突变的和细胞系的增殖，标记为。中显示了达沙替尼存在下的天增殖。对于和，看门突变与细胞系中发现的突变以顺式表达。，如中所示，针对稳定表达sh载体的、和细胞测量增殖，该载体靶向绿色荧光蛋白或的’sh或（sh）。与第天相比，在培养天后测量增殖。显示了三 次重复样品的。插图，免疫印迹显示实验中使用的细 胞系中的相对水平。“”，表达sh的细 美国在线电子邮件列表 胞；“”和“”是编号的目标发夹。，稳定表达异位的突变体和细胞系的天增殖通过靶，治疗比尼洛替尼治疗产生了更大程度的抑制，这一发现与体外计算的d值一致，尼洛替尼为n，为n，而达沙替尼为n（补充表）。靶向的sh杀死突变细胞系作为依赖性的独立测量，我们使用慢病毒载体在、和细胞系中表达靶向的sh。我们筛选了一组sh

癌样本进行测序可识别中的复发突变。，肺样本中突变的初级、次级和验证筛查。，的氨基酸序列，在已知的结构域结构中显示了已识别的突变位置。鉴近一项达沙替尼在肺癌患者中的药代动力学分析显示，在每日最大耐受剂量mg时，达沙替尼的峰值浓度在ng/mn范围内，该剂量已被批准用于治疗白血病。）。 在相同细胞系中进行测试时，伊马替尼的效力较低，的分别为和 突变的和细胞系（补充图）。达沙替尼和伊马替尼对细胞系的效果较差，已知该细胞系含有突变且没有任何突变（计算得出达沙替尼的为μ，伊马替尼为μ）。与之前的报告一致，包含扩增的细胞系对这两种药物均敏感，可作为我们测定的阳性对照批量短信泰国,）。值得注 意的是，癌症体细胞突变目录数据库中尚未报告或系 的其他体细胞突变来建议替代达沙替 美国在线电子邮件列表 尼靶点；之前的一份报告检查了种细胞系的药物敏感性，确定是对达沙替尼最敏感的肺系，尽管未对和进行测定。通过台盼蓝排除法测量，用达沙替尼处理突变细胞系似乎导致细胞死亡而不是细胞周期停滞（补充图）。达沙替尼治疗与细胞膜联蛋白染色增加相关，表明接受治疗的细胞因凋亡而死亡（数据未显示）。图图具有突变的肺癌细胞系对针对的药物和干扰敏感。，在不同浓度的达沙替尼存在

于是初次和二次筛选中最常见的突变基因，我们在队列中对进行了测序，产生了另外个突变样本，总体频率为（n在个总样本中，当排除细胞系时，原发性肺样本中的总体频率为（n中的个；图）。在激酶结构域和蛋白质序列的其他区域均发现了突变，并在处发现了个突变（图））。和突变分别在和细胞系中发现，其余突变在原代样本中发现。与的鼠类、斑 马鱼和秀丽隐杆线虫同源物相比，大多数突变位于氨 基酸高度保守的区域（补充图）。与正常肺或肺腺癌相比，对先前报告的拷贝数和基因表达数据集进行的额外基因组分析并未揭示任何在中过度表达的证据，我们也没有发现中的拷贝数变化（数据未显示；参考文献、）。对测序批量短信土耳其样本附带的有限临床信息的查询并未发现突变状态与患者年龄、性别或吸烟状况存在任何显着相关性。突变细胞系对酪氨酸激酶抑制剂选择性敏感为了评估靶向是否可能是肺的一种有前途的治疗策略，我们分析 了几种据报道可抑制的酪氨酸激酶抑制剂，包括伊马 替尼和达沙替尼，这两种药物已被批准用于临床用于靶向bl治疗慢性粒细胞白血病和急性白血病淋巴细胞白血病、胃肠道间质瘤中的c以及慢性粒单核细胞白血病中的血小板衍生生长因子受体,–。荧光共振能量转移测量提供了 美国在线电子邮件列表 重组的达沙替尼n和伊马替尼n的体外解离速率常数d值（补充表）达沙替尼对具有突变的细胞系表现出特别的功效，因为它抑制突变体和细胞的增殖，计算出的抑制浓度（）分别为和n（图）。值得注意的是，最

簇显着相关（p）。驱动程序改变在谱簇中显读数器iewuxerkinlmer测定细胞含量elliterloromega来克隆到petn载体中以产生无法复制的慢病毒。慢病毒感染后，通过用嘌呤开发（）。对激酶抑制剂有反应的患者更有可能患有的腺癌亚型（）。患有非小细胞肺癌另一患者很少对这些药物产生们还表明，突变具有致癌性，并且可以通过达沙替尼或酪氨酸激酶抑制剂组合治疗来阻断其转化 细胞的能力。此外，我们报告了肺鳞状细胞癌临床试 验受试者中的激酶结构域突变，该受试者对厄洛替尼和达沙替尼联合治疗有放射学反应，但没有突变。总之，这些数据表明可能是鳞批量短信菲律宾状细胞癌的重要治疗靶点。结果在肺中发生突变我们对最初的个原发性肺样本和匹配的正常对照中的个基因（包括整个酪氨酸激酶组）进行了桑格测序；我们在发现样本集中的个 基因中发现了体细胞错义突变，其中个位于酪氨 激酶基因中（图）。在n和酪氨酸激酶基因：n和激酶插入结构域受体；n；图中发现了复发性体细胞突变。随后对个突变酪氨酸激酶基因（、、、、和）进行测序，根据可能的治疗靶点进行选择，在个肺样本（包括个细胞系） 美国在线电子邮件列表 的二次筛选中，发现了个额外的突变（图）以及个突变、个和突变，以及和各有个突变。图。图鳞状肺癌样本的测序鉴定出中的复发突变。，肺样本中突变的初级、次级和验证筛选。，的氨基酸序列，在

增殖。对于软琼脂测定，将细胞分配在孔板中，在含有琼脂的固化培养基层上含有琼脂的生长培养基中。sh用多西环素诱导，并在铺板天后用刃天青染色评估集落形成。sh序列如下：sh。细胞系和原发性肿瘤的基因组分析详细描述可以参见arretina及其同事的报告（）；另见。简而言之，使用高密度阵列ffymetrix测量拷贝数，并使用基因模式管道eneatternpipeline将其标准化为拷贝数估计值（log比率；log比率等于标准化拷贝）（和hgffymetrix探针注释。使用算法识别样本特异性和重复的拷贝数变化。 根据制造商的说明，使用ffymetrixplus阵列获得m 表达水平。中的微阵列数据登录号是。c亚型m表达为aqan测定设计特异性监测c同工型表达的引物 探针：。对于内部对照，将β肌短信网关斯洛文尼亚动蛋白引物和探针（目录号：）与的引物和探针混合。使用 目录号），q热循环在°运行秒，°运行秒，°运行秒。来自人类原发性骨肉瘤样本的来自骨肉瘤的份基因组样本购自 癌症研究所（澳大利亚墨尔本；参考文献）。用于通过green测定确定拷贝数的引物为 研究是在诺华工厂进行的。所有原发性肿瘤样本均在手术时从 到了当地伦理委员会的批准。将肿瘤细胞或原发性 美国在线电子邮件列表 肿瘤的肿瘤碎片植入啮齿动物皮下。并在治疗过程中的指定时间监测肿瘤体积。数据以平均值±表示。使用单向方差分析和unnett检验进行组与媒介物对照组之间的比较。每个实验都标明了显着性水平。治疗结束时，切除肿瘤并在液氮中速冻。使用摇摆式研磨机（）粉碎冷冻组织，并在标准蛋白质裂解缓冲液中裂解肿瘤粉末以进行进一步的蛋白质印迹分析。激酶基因突变确定鳞状细胞肺癌的新治疗靶点彼得··哈默

（补理的,孔板中，使其粘附，并培养至小时。胞中，经过个以上的步骤，最终浓度范围为μmol/至nmol/，浓度统一为。将细胞化合物混合物孵育至小时，并使用发光板充图），表明依赖性可能是信号系统成分内在上调的结果，导致组成型通路激活。未来的研究将很有趣，以解决在没有基因拷贝数增加或激活受体突变的情况下导致/诱导的潜在机制。其他途径上 的表观遗传调节或遗传改变最终导致/表达和/或激 活升高，这似乎是合理的。例如，）。总之，通过利用注释和化合物敏感性数据的整合，我们已经确定了/系统各个成员中的遗传改变，这些改变赋予了批量短信尼泊尔癌症依赖性，从而代表了合适的预测生物标志物，以指导患者选择选择性靶向治疗药物，例如新型泛激酶抑制剂。基于这些数据，一项的期临床试验正在携带基因改变的癌症患者中进行（）。方法化合物和抗体已在（诺华）全球发现化学部门鉴定并合成，如所述。对于体外研究，在二甲 胞系获自美国典型培养物保藏中心、德国微生物保 藏中心和健康科学研究资源库，并在或u 美国在线电子邮件列表 lbecco改良agle培养基加nvitrogen中于°培养采用自动化处理。使用变体组合确认细胞系身份，并将其与之前的细胞系测试进行比较。高通量细胞活力测定的详细描述可以在arretina及其同事的报告中找到（）。简而言之，检测是自动化的，并通过超高通量筛选系统进行。将细胞系以终体积μ、每孔个细胞的浓度分配到经组织培养处

查看大图图浏览器下载高分辨率图像下载（）受影响基变体的致癌性，我们在细胞中异位表达缺乏外显子和的调用无效。使用微流体装置（luidigm）通过对所选突变过单因素方差分析–unnett与车辆对照进个食管肿瘤中的个中进行了研究，这是以前从未报道过的，从而为抑制剂的治疗应用提供了额外的新机会。有趣的是，我们还在个被抑制的膀的其他基因之一（、）可能已成为驱动基因。还值得注意的是， 我们的数据集中没有扩增的细胞系对抑制剂有 中的驱动癌基因。相反，一些对表现出敏感性的细胞系并不存在基因损伤。其中三个属于肝癌类型，显示配体、的拷贝数增加，当分析仅限于肝癌细胞批量短信卡塔尔系时，扩增与的反应在统计学上显着相关。此外，通过条件性敲低，我们在细胞中显示出对该的依赖性，从而支持/自分泌环作为具有扩增的肝癌致癌驱动因素的概念。与此自分泌环仅在辅助受体βlotho存在的情况下才发挥作用的观点一致，这对于与的高亲和力相互作用至关重要（），我们发现只有个具有扩增并同时表达βlotho的肝癌细胞对产生反应。这表明βlotho描绘了患者 选择的另一个关键决定因素，之前尚未对此进 行过分析。因此，扩增与其他癌症类型中 美国在线电子邮件列表 的反应无关，很可能是由于βlotho表达缺乏或较低所致。这与最近的一项研究一致，该研究表明扩增仅在肝癌细胞系中与表达增加以及对阻断的敏感性相关。总而言之，我们未检测到的/基因异常（n敏感细胞系。这些细胞系中的大多数为eneet特征阳性或表达高水平的和配体，并且通常表现出通路的组成型激活和治疗后的调节

增加（和/的log比率为，的log比率为），这可能是显着影响的原因。这些细胞系中转录物表达较高（补充图）。总而言之，这些数据支持对在存在基因扩增的情况下选择的癌症类型进行评估。药物敏感性的基因组预测因子还揭示了和突变位居前个最显着特征之列。在药理学上抑制了个突变细胞系中的个细胞系的 活力；它们属于子宫内膜和多发性骨髓瘤谱系，并 显示出组成型通路激活（补充图），这与这些突变导致受体激酶激活的观点一致,,。值得注意的是，大多数子宫内膜突变细胞系还携带影响或的突变（补充批量短信阿曼表），表明该通路的激活不会赋予该癌症类型对抑制疗法的耐药性。值得注意的是，我们在子宫内膜癌细胞系中观察到了组成型磷酸化，该磷酸化不受治疗的影响（补充图）。因此，磷酸肌醇激酶抑制剂可能为这些特定情况下与联合治疗提供机会。有趣的是，n的基因改变细胞系对 不敏感。至少在其中一些细胞系中，额外的基因改 变可能绕过了依赖性。例如，个细胞系具有 美国在线电子邮件列表 突变，n的细胞系显示其他癌基因扩增（扩增和α扩增），而n）携带突变（补充表）和预测模型揭示突变是不敏感的基因组预测因子之一（数据未显示）。因此，我们目前正在探索假设驱动的其他基因改变分子途径的伴随靶向是否会在这些情况下与产生协同作用。或者，在对没有反应的乳腺和肺扩增细胞系的情况下，峰中发现

 查看大图下载幻灯片肝癌细胞系中的扩增与的反应相关。，散点图显示肝癌细胞系中拷贝数与、和βlotho转录本表达之间的相关性。，抑制剂处理分钟后，通过蛋白质印迹分析通过yr磷酸化和rk/激活测量对这占对药物有反应的总细胞系的/。基因扩增最为普遍/，涉及、，令人惊讶的是，还涉及，其次是和的序列变异/以及影响和的染色体易位/。使用算法对上的高分辨率阵列数据进行分析表明， 位点位于扩增的焦点峰区域，而当分析仅限于胃癌细 胞系时，位于峰中。在这种情况下，反应与扩增和扩增均以统计学上显着的方式相关。这些数据证实了之前报道的乳腺癌、肺癌和胃癌细胞系中批量短信土耳其和拷贝数改变的发现,,），但它也揭示了这些遗传病变在其他癌症类型中的发生，例如骨肉瘤和结肠癌。在这种情况下，在的个骨肉瘤系中，在单层和软琼脂条件下，通过个不同的sh诱导敲低后，具有扩增的一个的生长受到显着抑制，这与扩增的概念一致赋予癌症依赖性。此外，我们首 次报告个原发性骨肉瘤中有个出现扩增，表明这 可能是抑制剂的另一个潜在适应症。同样，是唯一具有高水平的结肠癌细胞系扩增，对敏感。根据在其位点异常扩增时是驱动癌基因的观点，我们选择了存在拷贝数改变的人类原发性胃肿瘤，并证实它们对选择性抑制剂具有良好的反 美国在线电子邮件列表 应性，而模型拷贝数正常的患者对药物不敏感（数据未显示）。与之前通过,或outhernblot进行的拷贝数改变分析一致，我们发现了的高水平扩增（拷贝数>）通过方法，在总共个样本中的的胃肿瘤以及

下游信号传导的影响。α辅肌动蛋白的表达表明负载量相等。与非靶向sh相比，在多西环素ox诱导后，细胞中种不同靶向的sh的效果。在多西环素诱导和非诱导的细胞系中显示了表达和yr磷酸化。蛋白质印迹分析显示α肌动蛋白作为上样对照。，细胞接种后定的影响。个敏感肝癌细胞系显示出组成型酪氨酸磷酸化，该磷酸化在用nmol/剂量的处理后被消除图。 在肝细胞和肝癌细胞中，已被证明通过发出信 号。与这些发现一致，我们发现种细胞系表达显着高水平的m（图），并且在细胞系中用种不同的sh有条件沉默，之前显示需要才能生存，导致批量短信菲律宾显着抑制细胞增殖（图和）。因此，这些结果表明，虽然大多数具有q扩增的癌症可能对/抑制剂没有反应，但伴随βlotho表达的扩增肝癌子集可能为这种治疗方式提供合适的利基适应症。讨论在这项研究中，我们确定了的患者选择策略，是一种新型选择性泛激酶抑制剂，目前正在癌症患者中进行期 临床试验。为了指导患者选择并最大限度地提高患者 受益的可能性以及这种新型靶向抗癌方式成功的临床概 美国在线电子邮件列表 念验证，我们分析了从到的多种细胞系在细胞活力测定中的敏感性，将反应数据与基因表达和基因组改变的信息相交叉。我们发现，在与其作用机制一致且符合其高度选择性性质的浓度下可抑制约的测试癌细胞系的增殖。此外，事实上，在中具有药理学药物敏感性数据的个细胞系中，​​个具有基因改变，其中个对敏感；

 自用mg/kg处理在最后一次剂量处理后小时回收，并通过estern印迹分析来分析yr磷酸化和rk/激活。进行总、rk/和β微管蛋白蛋白质印迹分析以监测负荷。因此，扩增的细胞系在体外以及在体内作为人肿瘤异种移植物生长时对敏感。因此，我们预计携带扩增的人类胃肿瘤将在临床上对产生反应。有趣的是，除了证实胃癌中这种基因改变的发生率外，我们还在个食管肿瘤中的个中发现了扩增  这为抑制剂提供了新的潜在临床机会 补充图）。肝癌中的扩增与的反应相关大约对有反应的细胞系不含有基因改变。其中，如先前报道的，发现编码配体的基因在肝癌细胞系、批量短信香港和中扩增（log比率≥）（图）（）。对数据的分析显示，在各种癌症类型中，另外个细胞系的拷贝数有所增加（补充图，顶部）。然而，在扩增的细胞系中，只有种同时表达βlotho的肝细胞系对敏感，但携带的乳腺癌细胞系和肺癌细胞系（和）除外。放大（图和补充图，底部）。因此，isher精确检 验显示肝癌谱系中拷贝数与反应之间存在统计学显着 相关性，但在所有谱系中测试相关性时则 美国在线电子邮件列表 不然。图图肝癌细胞系中的扩增与的反应相关。，散点图显示肝癌细胞系中拷贝数与、和βlotho转录本表达之间的相关性。，抑制剂处理分钟后，通过蛋白质印迹分析通过yr磷酸化和rk/激活测量对下游信号传导的影响。α辅肌动蛋白的表达表明负载量相等。，与非靶向sh相比，在多西环素ox诱导后，细胞中种不同靶向的sh的效果。在多西环素诱导和非诱导的细胞系中显示了表达和yr磷酸化。蛋白质印

吸光度来量化细胞生长。数据表示为相对于未处理研究所和国家癌症研究所、联合抗击肺癌、肺癌研究基金会和美国肺脏协会的支持，箱线图显示了根据癌症类型聚类的个细胞系的拷贝数，以log比率表示。，乳腺癌、肺癌和骨肉瘤癌细胞系的散点图，显示拷贝数与转二甲基亚砜。通过慢病毒感染和嘌呤霉素选择，产生了在多西环素ox诱导型启动子控制下表达短发夹 式有效抑制肿瘤异种移植物的生长图 肿瘤生 长抑制与肿瘤组织中酪氨酸磷酸化的抑制相关（图），给药后小时几乎完全消除，给药后小时恢复，与化合物的药代动力学特征一致（印度群发短信）。isher精确检验的统计分析显示，扩增与整个中对的反应之间存在显着相关性×，以及仅限于胃癌和结肠癌谱系时×。为了进一步测试基因组扩增的预测价值，我们询问了个人类原发性胃肿瘤的集合，已为其生成了拷贝数和ffymetrix表达数据。选择显示拷贝数或更多且转录物过度表达的两个原发性肿瘤 用于体内小鼠抗肿瘤功效测试图 每日口服治疗 导致显着的肿瘤生长抑制，导致肿瘤在mg 美国在线电子邮件列表 /kg或更多的每日剂量下停滞和消退（图和）。在肿瘤模型中评价药效作用；在mg/kg剂量下，在给药后小时完全抑制酪氨酸磷酸化（图），与该化合物的药代动力学特征点图，显示拷贝数和转录物表达之间的关系n。具有基因扩增的胃肿瘤和分别为和在小鼠皮下生长。当平均肿瘤体积为至mm时，开始使用所示剂量的治疗，并持续长达或天。显示了治疗过程中肿瘤体积的变化。统计分析是通

sh的稳定细胞系。蛋白质印迹分析显示，与种非靶向sh（sh和sh）相比，sh和sh能有效敲低、p和prk。β微管蛋白蛋白质印迹分析显示为上样对照。和，与非靶向sh相比，靶向对单层细胞增殖和贴壁依赖性细胞生长测定的影响）的细胞。对于单层细胞增殖测定，在细细胞生长，而软琼脂测定则给出终点测量（细胞接种后第天）。，通过定量实时分析了一组个原发性人骨肉瘤样品中的拷贝数。数据显示为的平均值 查看大图下载幻灯片胃癌和结肠癌细胞系中的扩增与反 应相关。箱线图显示了根据癌症类型分组的个细胞系的拷贝数，以log比率表示。，胃癌和大肠癌细胞系的散点图，显示拷贝数和转录物表达之间的相大量短信爱尔兰关性。，通过yr磷酸化和rk/激活测量对下游信号传导的影响。α肌动蛋白和总rk/蛋白水平显示为上样对照。，肿瘤异种移植裸鼠连续天接受指定剂量的或载体（每组n）。显示了肿瘤体积随时间的变化。通过单向方差分析unnett与载体对照进行统计分析（，）。 乙剂量治疗后小时和小时回收肿瘤组织，并 通过蛋白质印迹分析来分析yr磷酸化。进 美国在线电子邮件列表 行总蛋白质印迹分析以监测等量加载。由于材料不足，用mg/kg治疗的肿瘤的药效学分析不可行。，泌尿道。与高水平的基因表达一致，扩增的胃癌细胞系（和）和结肠癌细胞系（）表现出很强的通路基线活性，该活性受到治疗的调节（图）。），并且增殖依赖于信号传导，从的低纳摩尔可以明显看出（补充表）。与体外增殖的抑制相一致，当每天口服给大鼠时，也以剂量依赖性方

录本表达之间的相关性。细胞系根据对的反应进行着色。，通过yr磷酸化和rk/激活测量对下游信号传导的影响。α肌动蛋白和总rk/蛋白水平显示为上样对照。，二甲基亚砜。，通过慢病毒感染和嘌呤霉素选择产生在多西环素（ox）诱导型启动子控制下表达短发夹（sh）的稳定细胞系。蛋白质印迹分析显示，与种非靶向sh（sh和sh）相比，sh和sh能有效敲低、p和prk。 β微管蛋白蛋白质印迹分析显示为上样对 照。和，与非靶向sh相比，靶向对细胞的单层定的影响。对于单层细胞增殖测定，在细胞接种后指定的天数监测细胞生长，而软琼脂测定则短信网关挪威给出终点测量（细胞接种后第天）。，通过定量实时分析了一组个原发性人骨肉瘤样品中的拷贝数。数据显示为的平均值n≥。r，乳房；h，软骨肉瘤；，拷贝数；o，结直肠癌；恩，子宫内膜；埃克,细胞外信号调节激酶；s，食道；呃，尤文肉瘤；a，胃；l，神经胶质瘤；，造血和淋巴组织； ，头部和颈部；气，肾；黎，肝；禄，肺；我，黑色素瘤 ；女士，间皮瘤；b，神经母细胞瘤；骨，骨肉瘤；v，卵巢；a，胰腺；h，甲状腺；，泌尿道。查看大图下载幻灯片乳腺癌、肺癌和骨肉瘤癌细胞中的扩增与的反应相关。箱线图显示了根据癌症类型聚类的个细胞系的拷贝数，以log 美国在线电子邮件列表 比率表示。，乳腺癌、肺癌和骨肉瘤癌细胞系的散点图，显示拷贝数与转录物表达之间的相关性。细胞系根据对的反应进行着色。，通过yr磷酸化和rk/激活测量对下游信号传导的影响。α肌动蛋白和总rk/蛋白水平显示为上样对照。，

靶向依赖性抑制的范围，使用在依中获得的值作为参考。在此基础上，只有增殖受到抑制且小于nmol/的癌细胞系才被归类为敏感的。从高通量检测中选择的个细胞系中，有个被确认对敏感，为范围从到nmol/（补充图）。此外，还对来自的个无法获得高通量细胞系分析数据的选定细胞系进行了手动细胞增殖测定， 发现其中个细胞系对抑制剂敏感补充图总的来 说，在接受活力测试的来自的个细胞系中，当截止值为nmol/时，发现（包括种不同的癌症类型）对敏感。应用细胞增殖的靶向抑制（图）。图图抑制部分癌细胞系的增殖。散点图显示在根据癌症类型的细胞系的细胞活力测定中以μmol/表示的值。总共的细胞系对浓度高达nmol/的敏感。具有复合“遗传改变”特征的细胞系以红色表示。点水平抖动以批量短信斯洛伐克提高可读性。查看大图下载幻灯片抑制一部分癌细胞系的增殖。 散点图显示在根据癌症类型的细胞系 的细胞活力测定中以μmol/表示的值。总共的 美国在线电子邮件列表 细胞系对浓度高达nmol/的敏感。具s图）。骨肉瘤细胞系中扩增的功能相关性促使我们研究一组原代人骨肉瘤样本中的拷贝数水平。与内个骨肉瘤细胞系中的个中的扩增一致，我们鉴定了个原发性骨肉瘤样本中的个为扩增（图）。有趣的是，细胞系和原发性肿瘤样本都显示出相似的扩增水平，两种情况下都有大约个基因拷贝。图图乳腺癌、肺癌和骨肉瘤癌细胞中的扩增与的反应相关。

和是oundationedicine的创始人和股东，该公司是一家提供下一代测序诊断服务的营利性公司。是oundationedicine的员工。并由一个匿名基金会提供。这项究所和国家癌症研究所、联合抗击肺癌、肺癌研究基金会和美国肺脏协会的支持。、和是oundationedicine的创始人和股东，该公司是一家提供下一代测序诊断服务的营利性公司。是oundationedicine的员工。并由一个匿名基金会提供。 这项工作得到了国家人类基因组研究所和国家癌症 研究所、联合抗击肺癌、肺癌研究基金会和美国肺脏协会的支持。、和是oundationedicine的创始人和股东，该公司是一家提供下一代测序诊断服务的营利性公司。是oundationedicine的员工。一家提供下一代测序诊断服务的营利性公司。是oundationedicine的员工。一家提供下一代测序诊断服务的营利性公司基因改变预测短信网关保加利亚对（一种选择性泛抑制剂）的敏感性维托·瓜尼亚诺；奥黛丽·考夫曼；西蒙·沃尔勒；克里斯特尔·斯塔姆；伊藤盛子路易丝·巴里斯；阿斯特丽德·波农；瑶瑶方莉张云陈志克里斯托弗··威尔逊；文森特·博尔达斯；米凯尔·勒·杜热ickaëleouget；· 亚历克斯·盖瑟；贾森·博拉夫斯基；约翰··莫纳汉；卡维莎·文 卡特桑；托马斯·布吕门多夫；大卫··托马斯；卡洛斯·加西亚埃切维里亚；弗朗西斯科·霍夫曼；威廉·塞勒斯；戴安娜·格劳斯波塔十字标记：检查更新作者和文章信息癌症发现–。文章历史相关内容评论已发表：谱系特异性生物标志 美国在线电子邮件列表 物预测对抑制的反应相关文章已发表：本期分屏视图图标意见打开在另一个窗口中分享图标分享工具图标工具搜索网站文章版本图标版本抽象的能够将癌症遗传知识转化为临床应用的患者分层生物标

进行靶向重测序以进行验证。具有luidigm兼容尾部的引物被设计为位于感兴趣位点的侧翼并产生bp/bp的扩增子。每个样品–ng与含有llumina接头序列、样品特异性分子条形码和与引物尾部互补的序列的寡核苷酸混合。该混合物用作在luidigmaccessarray上扩增的每个样品的模板。该方给定样品的所有扩增子都收到相同的测序条形码。根据制造商的说明在luidigmaccessarray上进行。在luidigmaccess阵列 上的单个收集孔中回收每个样品的条形码文库 ，使用icoreends定量试剂（nvitrogen，卡尔斯巴德，加利福尼亚州）进行定量，并对各个文库的浓度进行标准化。将文库加载到lluminai仪器上，并使用双短信网关塞尔维亚端bp测序读数进行测序。希等人，尤扎等人，）。所有质粒均通过测序确认。细胞培养和通过病毒转导产生细胞系通过逆转录病毒感染建立稳定表达外显子、缺失、突变体或野生型的混合细胞系和a/细胞，并按先前所述进行维持（格罗伊利希等人，江等，）。在刺激和收获之前， 将培养物进行血清饥饿小时。表皮生长因子 ，iosource）用ng/ml处理分钟。不依赖贴壁 美国在线电子邮件列表 的生长测定如前所述，软琼脂测定一式三份进行（格罗伊利希等人，）。使用mage软件对软琼脂中形成的菌落数进行定量。每个测定至少重复两次并获得可比较的结果。细胞生长抑制试验将a/细胞（,个细胞）接种于孔平底板（orning）的μl培养基中，并在小时后按照所示浓度添加在μl细胞培养基中制备的埃罗替尼。与ellountingit溶液（ojindo，熊本，日本）孵育小时后，通过光谱仪测量波长nm处的

病理学家通过内部审查ioerve、进行验证。麻省理工学院和哈佛大学布罗德研究所。由ravis领导的专家委员会进行了第二轮病理学审查，所有倾向于诊断为腺癌以外的肿瘤均从研究中删除。其中一个肿瘤样本经审查被诊断为潜在混合性肺腺癌和大细胞神经内分泌癌。使用哈佛大学和案，获得了每个样本的知情 同意和道德投票机构审查委员会 和。有关样品制备的更多详细信息，请参见扩展实验程序。制备和质量控制我们使用了最近描述的标准roadnstitute协议（伯杰等批量短信瑞典人，查普曼等人，斯特兰斯基等人，）。使用icoreends定量试剂测量肿瘤和正常浓度。测序所需的最低浓度为ng/μl。如果浓度，则需要乙醇沉淀并重新悬浮以增加浓度。凝胶电泳证实了高分子量>kb。所有肿瘤和正常样本（天然和产品）的身份均通过个 常见（equenom，圣地亚哥，加利福尼亚州） 的质谱指纹基因分型确认，并与序列数据进行 美国在线电子邮件列表 比较。为了进行验证实验，我们使用基于hi的全基因组扩增（、genepli试剂盒）准备了每个样品的储备库。单核苷酸多态性芯片根据制造商的方案，使用ffymetrix全基因组人类阵列ffymetrix,nc处理来自肿瘤和配对正常样本的天然基因组。用sp和ty酶ewnglandiolabs消化，使用连接酶ewnglandiolabs连接到相应的ffymetrix接

验程序）。我们通过应用以否可能与病例j中一种或多种癌症标志的“驱动因素”有关：我们推断出桑格基因普查注释为“显性”癌症基因的基因的激活状态（例如，）通过评估基因中的每个非同义变异是否存在于热点（福布斯等人，）。数据库/中出现至少十次的突变被认为是 致癌突变 如果显性基因含有这样的变异或高水平 的局部扩增，我们认为显性基因被激活。我们认为隐短信群发捷克共和国性癌症基因（例如，）如果具有（）截短突变，（）复合错义突变，（）半合子错义突变或（）纯合拷贝数丢失，则该基因失活。如果样本在显性或隐性癌症基因中分别包含至少一个映射到标志k的激活或失活事件，则我们将每个患者j映射到标志k。扩展实验程序详细群组描述我们从六个来源地点获取了肿瘤和匹配的正常邻近组织的：ioserve（例）、安大略癌症研究所（例）、 马克斯普朗克研究所科隆肺癌小组（例）例）、 人类组织合作网络（）（例）和纽约大学癌症 美国在线电子邮件列表 中心（）（例）进行外显子组捕获分析。这个肿瘤/正常样本对中的个用于全基因组分析，其中例来自ioserve，例来自，例来自。我们从纪念斯隆凯特琳癌症中心获得了另外一对肺腺癌肿瘤/正常细胞，用于全基因组测序。除患者外，所有样本的均从原发性肺癌切除

无关的基因的新改变（通过额外的无偏见分析将出现）来解释。在注释个已知的肺腺癌基因时，我们注意到（一种表观遗传调节因子和肿瘤抑制因子）无法清楚地映射到任何癌症标志。鉴于最近的癌症基因组扫描发现表观遗传和剪接调节因子频繁发生体细胞突变（lsässer等人，）和我们的研究 ），我遗传和失调的新标志。总之，这些基因在相当大比例的病例中暗示了拟议的第十一个标志（仅包括， 包括提名基因 肺腺癌体细胞遗传学研究的效率 和力量这项研究代表了迄今为止最大规模的肺腺癌测序分析。我们的分析揭示了肺腺癌在碱基对和结构水平上的基因组复杂性，超过了大多数其他肿瘤类型的基因组特征研究中观察到的复杂性。我们应用了最近发布的统计方法（霍迪斯等人，）用批量短信比利时于识别体细胞突变基因，这些基因显示出癌症中正选择的证据。这种排列方法利用和中检测到的丰富的内含子和侧翼突变事件来充分模拟中性突变率的基因特异性变异。霍迪斯等人，）。我们相信， 需要这种校准方法来识别大型无偏见癌症基因组扫描 中的阳性体细胞选择信号。这种担忧与体细 美国在线电子邮件列表 胞突变率高的肿瘤类型尤其相关，例如肺腺癌或黑色素瘤。这项研究发现了肺腺癌中个基因的显着突变。值得注意的是，我们的研究并未在每个肿瘤样本中发现突变的癌基因。此外，我们无法在统计上提名几个重要但很少突变的肺腺癌基因（、、和，在我们的队列中每个基因的事件数≤）。因此，癌症基因组图谱和其他联盟对更大队列的未来研究，结合测序seq、甲基化分析和其他组学平台的数

个基因和）。接下来，我们将此基数据相结合，以估计肺腺癌中癌症标志改变的患病率（图和表）。图缩略图gr图肺腺癌的下一代标志显示完整标题查看大图图浏览器下载高分辨率图像下载（）对于我们队列中的许多病例，我们只能将十种癌症标志中的少数归因 于独特的遗传病变（图）） 只有的肿瘤具有与所 有六个经典标志相关的改变，并且没有一个改变影响所有十个新兴和经典标志。相比之下，我们的队列中的人没有出现任何一个标志性改变，的人只有三个或更少。这一发现可能部分是由于我们的研究中未检测到的机制改变了癌症基因，并且还表明许多肺腺癌基批量短信荷兰因尚未被发现。这可能与避免免疫破坏和促进肿瘤的炎症的标志特别相关，而我们的研究或之前的研究中发现的反复突变的基因都无法与这些标志相关。最重要且可靶向治疗的癌症标 因标志映射与我们的体细胞突变和拷贝数 列中不到一半的人在该标志的已知驱动基 美国在线电子邮件列表 因中存在突变，当在一个或多个增殖信号基因（例如、和。图缩略图igs图肺腺癌病例中“标志”改变的分布，与图相关显示完整标题查看大图图浏览器下载高分辨率图像下载（）我们对癌症标志的体细胞改变的绘制揭示了对肺腺癌体细胞遗传基础理解中的特定差距。大约一半的测序队列缺乏支持持续增殖信号的突变，大多数缺乏解

变所观察到的，稳定表达该转基因的细胞在软琼脂中表现出集落形成（图），并且在没有的情况下和磷酸化增加（图）。相反，表达野生型的细胞仅在存在的情况下形成集落（图）。a/细胞中转基因的过度表达导致不依赖于白细胞介素的增殖，而这种增殖可通过酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼治疗来阻断（图，之前显示的浓度足以抑制的激活变体（尤扎等人，）。在肺腺癌癌基因中没有突变的肿瘤中具有框内重排 的激酶包括和（图） 过定量q鉴定并验证了（盐诱 导激酶）中的框内激酶结构域重复。复制发生在hr上游个氨基酸处，其中相关激酶被激活（桥本等人，）。中发现了个外显子重复，是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，充当ho信号传导的效应器（皮尔斯等人，）。值得注意的是，我们没有发现批量短信波兰任何涉及肺腺癌、和中激酶融合靶标的框内重排。鉴于他们报道的肺腺癌发生率为–（伯杰森等人，竹内等人，），我们对个肿瘤/正常对的研究可能不足以检测这些重排。有趣的是，在一名患者中发现了框架 外易位，但没有证据表明先前描述的相互激活事件。表中 对每个案例的帧内融合和插入缺失进行了注 美国在线电子邮件列表 释。讨论绘制肺腺癌的下一代标志定义为“癌症的标志”哈纳汉和温伯格，,哈纳汉和温伯格，，包含一组被认为是肿瘤发生所必需的细胞特征。它们还代表了一个强大的框架来评估我们对驱动肺腺癌的基因改变的理解。为了这个目标，我们将个经过实验验证的肺腺癌基因分别映射到来自以下来源的一个或多个癌症标志：哈纳汉和温伯格，,哈纳汉和温伯格，（表和实验程序）。这个基因包括上面讨论

重排中保留了（,个中的个）。其中包括个蛋白质融合、个重复和个缺失。我们发现了个重排，它们融合了两个基因的，而不影响任一基因的蛋白质编码序列。我们测试的所有个基因融合体均通过和llumina测序进行了确认（参见扩展实验程序）（表）。就其大小而言，重排率最高的基因是（次重排/测序b）。两个病例存在框外反义融合（和orf），第三个病例存在框内缺失（图）。如肺鳞状细胞癌中所示，除了报道的突 变、纯合缺失和甲基化之外，重排代表了失活的另一种 机制。癌症基因组图谱研究网络，）。受预测无效批量短信罗马尼亚重排或截短重排影响的其他肺腺癌肿瘤抑制因子包括（kb删除，去除翻译起始位点）和（midexon重排）（图）。接下来我们关注潜在激活的激酶基因的框内重排。该分析发现了中的两个外显子缺失，该缺失先前在多形性胶质母细胞瘤中发现，但在肺腺癌中是新发现的，消除了由外显子和编码的末端的一部分（图、和）），包括与相互作用相关的残基（惠勒和多明，）和（røvdal等人，。 先前已在胶质母细胞瘤中发现了类似的末端缺失变异 体vb。埃克斯特兰德等人，）并已在细 美国在线电子邮件列表 胞和动物模型中显示出致癌性（曹等人，派恩斯等人，）。该肿瘤包含的第二个体细胞改变，即p突变，表明激活突变可能具有协同作用，或者存在独立的亚克隆激活突变。图缩略图gr图中新型肺腺癌框内缺失的鉴定显示完整标题查看大图图浏览器下载高分辨率图像下载（）图缩略图igs图重排双端和拆分读段映射，与图相关显示完整标题查看大图图浏览器下载高分辨率图像下载（）为了评估这种新型

果。最后，我们在名有数据的患者中筛选了个显着突变的基因，以确定其与无进展生存期的关系。（p，对数秩检验）和突变（p，对数秩检验）与生存率显着降低相关（图）。后一个发现与之前的报告一致（小坂等人，光富等人，）。没有发现与存在其他显着关联。候选肺腺癌基因的提名该肺腺癌队列中突变最显着的基因之一是（p×，nx），该基因在的病例中存在非同义突变（图）。在例突变病例中，有 例观察到相同的 突变（图）；这是骨髓增生异常 综合征中报道的确切突变（格劳伯特等人，吉田等，）。据我们所知，这项研究是上皮肿瘤中突变的第一份报告。四个p突变之一与p中的激批量短信尼泊尔活事件一起发生，表明突变可能具有独立于已知的增殖维持驱动基因的致瘤能力。如上所述，四名突变患者和生存数据的显着降低（图）。在另外例病例中映射（巴纳吉等人，巴斯等人，梅德韦杰夫等人，）检测并绘制个病例中,个体细胞重排的断点图。其中大部分是染色体内重排（,个事件），但包括个 染色体间事件。其中有,个（）基因重排（即，其中一 个断点包含在基因的启动子、、内 美国在线电子邮件列表 含子或外显子内）和个（）纯粹基因间事件。肺腺癌具有广泛的总重排（中位数：；范围：）、基因重排（中位数：；范围：）（图）和整体基因组复杂性（图）。病例之间重排计数的变异性与临床变量不相关（图和表）或突变谱。表提供了重排坐标和解释。图缩略图gr图肺腺癌全基因组测序显示完整标题查看大图图浏览器下载高分辨率图像下载（）图缩略图igs图所有患者的图，与图相关显示完整标题

会产生更大的预测能力。介绍选择免疫检查点抑制剂s）治疗前景，包括非小细胞肺癌）。由于只有一小部分肺癌患者对有反应，因此迫切需要开发临床实用工具来识别最有可能获得临床获益的患者子集。迄今为止，美国食品和被纳入其中。未确定预先指定的样本量。使用实体瘤疗效评估标准版来评估疗效；扫描结果由胸部放射科医生或）进行审核图，仅限在线）。无法进行放射学评估的患者被排除在外。无进展生存期  是从患者开始免疫治疗之日到疾病进展之日进行评估。未 进展的患者在最后一次扫描日期进行审查；根据群发短信沙特阿拉伯回顾性判定为非进展性疾病但由治疗临床医生实时确定为的病例被视为事件。除了定义的缓解外，疗效还被定义为持久临床获益；完全缓解部分缓解或持续>个月的稳定疾病）或无持久获益或持续≤个月的；附录图，仅限在线）。未进展且在个月随访前进行审查的患者被认为不可评估。总生存期从治疗开始日期开始计算。未死亡的患者在最后一次接触的日期进行了审查。为了提供比较队列，我们​​确定了年月至年月期间接受过测试且未接受任何免疫治疗的患者非；n）。为了与从复发或转移性疾病日期计算）特别相关的比 较，使用了患有晚期肺腺癌的非患者的子集非晚期 附录 图）。测序测定如前所述进行。简而言之，从肿瘤和 美国在线电子邮件列表 患者匹配的血液样本中提取。生成条形码文库并对其进行测序，并针对个名患者；第版）个名患者；第版）或个名患者，第版）基因的定制基因组的所有外显子和选择内含子附录表，仅在线）。所有肿瘤样本的平均测序覆盖度为×，最小覆盖深度为×。样本通过定制管道运行以识别体细胞改变，包括突变和拷贝数改变。

志物是错配修复缺陷，特别是在中，程序性死亡配体的表达。大多数试验已证明表达较高的肿瘤的缓解率有所提高，但缓解的富集并不完整。我们的小组和其他人已经证明，更大的体细胞突变负担与多种肿瘤类型对免疫治疗产生反应的可能性更大相关，包括黑色素瘤膀胱癌非小细胞肺癌和错配修复缺陷肿瘤。这些研究确立了肿瘤突变负荷作为可能与多种肿瘤类型相关的生物标志物的重要性。然而，大多数研 究都使用全外显子组测序来量化，这种方法目前在临床环境 规模上不可行或不方便。相比之下，使用靶向下一代测序对肿瘤进行基因组分析已变得越来越常规。在纪念斯隆·凯特琳癌症中心，基于定制杂交捕获的检测纪念斯隆·凯特琳可操作癌症靶标的综合突变分析）已用于分析超过个肿瘤。我们假设靶向测斯里兰卡的群发短信服务定的可能与患者对免疫治疗的反应相关。为了解决这一假设，我们检查了名通过靶向分析并接受抗或​​抗抗治疗的患者。还通过分析了这些患者的肿瘤子集，以检查两种方法得出的的相关性。 二次分析包括检查从靶向获得的其他分子特征的关联，例 如拷贝数改变和特定基因，与的反应或耐药性以及和表 美国在线电子邮件列表 达之间的关系。方法选择患者经机构审查委员会批准，晚期患者在年月第一个日期）期间接受抗单药治疗或联合抗细胞毒性细胞淋巴细胞抗）治疗。确定了患者在我们中心接受治疗的日期）和年月开始治疗的最后日期，以便在年月数据库锁定之前有足够的时间进行至少一次疗效评估）。患有经分子分析的肿瘤的患者也

助和编辑费用外提供的资助。其他作者没有披露任何潜在的利益冲突。通过靶向下一代测序分析非小细胞肺癌患者抗程序性细胞死亡和抗程序性死亡配体阻断反应的分子决定因素希拉·里兹维弗朗西斯科·桑切斯维加康纳·拉瓦利德·查蒂拉菲利普·琼森达拉·哈尔彭尼展示更多和。对这项工作做出了同样的贡献。抽象的全文图表补充剂抽象的选择目的使用免疫检查点抑制剂s）治疗晚期非小细胞肺癌的特点是在 部分患者中产生持久的反应并提高生存率需要临床上可用的 工具来优化的使用并了解反应的分子决定因素。靶向下一代测序越来越常规化，但其在识别反应预测因子方面的作用尚不清楚。方法收集了接受抗程序性死亡或批量短信南非抗程序性死亡配体抗程序性细胞死亡治疗的晚期非小细胞肺癌患者的详细临床注释和反应数据，并进行了分析通过目标；n）。根据实体瘤疗效评估标准版评估疗效，持久临床获益定义为持续>个月的部分缓解疾病稳定。对和无持久获益患者的肿瘤突变负荷拷贝数改变的基因组分数和 基因改变进行比较。对名患者进行了全外显子组测序较靶向与的定量结果。结果目  的高于患者。更常见，并且在第个百分位数以上阈值增 美国在线电子邮件列表 加的患者中，无进展生存期更长vs；；风险比，；）。患者中拷贝数改变的基因组比例最高。和的变异与缺乏益处相关。和表达是自变量，加的复合物进一步丰富了的益处。结论靶向可以准确估计，而的升高进一步提高了受益的可能性。与表达不相关；两个变量具有相似的预测能力。将和表达纳入多变量预测模型应该

利正在申请中并已授权给x。iely在研究进行期间报告了的资助；助和编辑费用）诺华与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）武田与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）的资助和其他费用，以及在提交的工作之外获得默克和罗氏的资助。其他作者没有披露任何潜在的利益冲突。以及礼来公司在研究进行期间提供的非财务支持，并报告了专利正在申请中并已授权给x。iely在研究进行期间报 告了的资助；辉瑞与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费 用）诺华与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费加纳的批量短信服务用）武田与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）的资助和其他费用，以及在提交的工作之外获得默克和罗氏的资助。其他作者没有披露任何潜在的利益冲突。iely在研究进行期间报告了的资助；辉瑞与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）诺华与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）武田与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）的资助和其他费用，以及在 提交的工作之外获得默克和罗氏的资助。其他作者没有披露任 何潜在的利益冲突。iely在研究进行期间报告了的资助 美国在线电子邮件列表 ；辉瑞与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）诺华与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）武田与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）的资助和其他费用，以及在提交的工作之外获得默克和罗氏的资助。其他作者没有披露任何潜在的利益冲突。武田与赞助研究出版物相关的机构资助和编辑费用），以及默克和罗氏在提交的工作之外提供的资助。其他作者没有披露

管结果不佳，但加敏感，这可能会在未来带来新的治疗选择。潜在利益冲突的披露avery报告了美国癌症研究协会薪资支持）提交的工作之外的其他内容。oncepcion在研究进行期间报告了美国癌症协会博士后奖学金）和科赫研究所五年博士后奖学金）的其他报告。rcila报告已提交作品之外的来自nivoscribe演讲者费用）和iocartis演讲者费用）的其他内容。acks是mgen和hermoishercientific的董事会成员， 科学顾问委员会任职；这些隶属关系都不代表本研究的设计或执 行或本手稿中数据的解释存在利益冲突。。acks实验室目前还获得强生肺癌倡议和ustgarten胰腺癌研究基金会的资助，但这笔资金并不支持本手稿中描述批量短信新西兰的研究。udin报告了来自的个人费用）在提交的作品之外。aylor在提交的作品之外报告了基因泰克公司enentechnc的资助和个人费用勃林格殷格翰oehringerngelheim的个人费用以及礼来illy的oxoncology的个人费用。ellmann报告了来自的赠款个人费用和非财务支持，以及来自阿斯利康 hattuckabs和rcus的个人费用和非财务支持，默克罗氏 基因泰克ektaryndaxiratimmunailueprint和chilles提供 美国在线电子邮件列表 的个人费用，以及礼来公司在研究期间提供的非财务支持，并报告专利正在申请和许可进行x。iely在研究进行期间报告了的资助；辉瑞与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）诺华与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）武田与资助研究出版物相关的机构资助和编辑费用）的资助和其他费用，以及在提交的工作之外获得默克和罗氏的资助。其他作者没有披露任何潜在的利益冲突。

错义突变会改变开放染色质景观并诱导及其靶基因等的促癌表达变化。我们的研究是第一个评估中改变如何影响敏感性的研究。最近的分析表明，和可能与卵巢癌和肾细胞癌亚型的免疫治疗反应改善相关，病例报告描述了胸部缺陷型未分化患者对的持久反应。肿瘤也称为缺陷型胸部肉瘤）和患者。尽管阴性率很高，但突变患者似乎从阻断中获得显着益处。所以，突变状态应作为对反应的潜在新型生物标志物 进行探索，作为中表达和的补充 尽管目前尚无针对突变的有 效靶向治疗，但我们的研究和其他研究表明是肺癌的潜在靶点，具有独特的治疗弱点。例如，和抑制最近在缺陷肿瘤的临床前模型中显示出抗肿瘤活性–。可能是突变癌批量短信中国症中的合成致死漏洞。先前的报告表明，在突变中保留表达，目前正在开发几种抑制剂来针对这一潜在漏洞）。考虑到我们分析中抗抗体的功效，未来的试验应探索单独使用这些药物或与联合使用。本研究是单机构回顾性分析，因此具有一些固有的局限性。与免疫治疗和的暴 露和反应相关的未知因素可能会使我们的结果产生偏差。尽管 如此，我们还是考虑了所有可能影响结果的已知潜在变 美国在线电子邮件列表 量。例如，我们开发并纳入了风险评分，以考虑患者接受抗治疗的可能性，并使用ox比例风险模型使用可用变量进行多变量分析。调整表达的分析受到具有足够可用组织进行和回顾性染色的患者数量的限制。未来还需要结合接合性的研究来了解其对表达和临床结果的影响。总之，我们的报告强调肺癌中的改变与免疫治疗的反应和患者的结果有着独特的联系。我们发现异常的存在在和突

达频率。按改变类别。按变更等级。按修改类。最后，我们试图比较接受的患者中两种突变型和野生型的结果。对名接受的患者中的名进行了总体反应评估。在未经调整的分析中，与类改变或野生型肿瘤相比，具有类改变的患者具有更高的，图）。改变状态对的）或）没有差异图）。讨论在这里，我们确定了两类特定的改变，它们与转移性患者的不同蛋白表达和差异阴性临床结果相关。尽管的两类改变都与不良的临 床结果相关，但与蛋白质丢失相关的类改变是患者最强的独立负 面预后因素，但对的反应最好。尽管与野生型肿瘤患者大量短信伊朗相比存在负面预后影响，但接受治疗的改变患者的预后优于未接受的患者。这项研究基于最近的数据，即肺癌中同时发生的和突变可以显着影响预后和治疗反应。和的改变与突变肿瘤以及最近所有患者的不良预后和免疫治疗缺乏反应有关。我们发现改变与和突变相关，但它们是不良预后的独立预测因子。异常与和或组合突变对缩短生存期具有附加影响。然而，与不同，似乎与免疫治疗敏感 性增加有关。和的未来研究应结合对的探索，以进一步描述每个 同时发生的突变在影响患者结果中的作用，并且应在未 美国在线电子邮件列表 来的前瞻性试验中将作为潜在的预后或预测变量进行识别和测试。我们观察到改变的范围对蛋白质表达有不同的影响。我们的研究结果与最近评估突变型肺癌发生率和截短突变导致的蛋白质表达丢失频率的其他分析一致，支持我们的分类方案。有趣的是，虽然类截断）改变的影响最为深远，但我们还意外地发现，类错义非截断）改变的患者相对于患者的总体预后更差野生型肿瘤，表明在

>py）目前吸烟者组织学腺癌其他缩写：py，包年。类和类改变对晚期的预后影响总体而言，我们发现，与野生型患者相比，携带类或类改变的转移性患者的较短；图）。类改变与最差的结果相关图）。多变量生存分析中的结果差异根据年龄性别吸烟状况组织学以及和 或突变的存在进行调整图图改变类别 的存活率。，所有患者的，采用多变量模型右）。，突变患者的，采用多变量模型右）。变类别生存。，所有患者的，采用多变量模型右）。，突变批量短信澳大利亚患者的，采用多变量模型右）。考虑到同时发生的突变的异质性，我们试图通过在单个驱动癌基因的背景下进行检查来进一步分离改变的具体影响。我们最初关注的是名携带突变的肿瘤患者。在这些患者中，类或类改变的存在是 不良的预后因素，并且在考虑年龄性别吸烟状况组织学以及 或突变的存在时仍然是预后因素图）。此外，添加和 美国在线电子邮件列表 或与生存率降低相关，所有这三种情况的患者和的存活期最短，补充图）。与免疫治疗的益处相关接下来，我们分析了对患者预后的影响。在改变的患者中，的使用与开始时的生存率显着改善相关，；，；；图）。当评估预测结果的已知因素时，突变肿瘤具有较高的，图），但更有可能较低或呈阴性，图）。与类改变相

相关；图）。与改变相关的分子景组背景，我们评估了含有改变的肿瘤n和没有改变的肿瘤n的基因组图谱。在肺癌中常见改变的基因中，与改变同时发生的最常见突变是和；图和。图图改变的基因组背景。，改变最常见的同时发生的改变。，中常见改变基因亚组的​​改变分布。，突变体与野生型亚组中个体基因改变的频率。标记为红色的基因与显着差异的表达相关q值）。，队列中和改变的分布。查看大图下载幻灯片改变 的基因组背景改变最常见的同时发生的改变中常见改变 基因亚组的​​改变分布。，突变体与野生型亚组中个体基因改变的频率。标记为红色的基因与显着差异的表达相关q值）。，队列中智利短信网关关联性最强，q；，q；图和）。相反，与突变体相比，改变在野生型肿瘤中密切相关，q）。的病例在没有和改变的情况下发生改变图）。变异在类变异中发生的频率明显高于类变异，q，补充表）。和变异在类变异中也更常见分别为，q；，q），变异在类变异中常见，q，补充表。按改变类别划分的晚期患者特征然后，我们研究了分子和表 达分析的结果如何与晚期患者的临床结果相关。具有类n和类n 改变的期肿瘤的患者特征总体相似表）。与野生型患 美国在线电子邮件列表 者相比，类或类改变的存在与吸烟史和非腺癌组织学相关n；表。携带任一类的患者突变，是吸烟者，患有腺癌；其余的主要为非小细胞肺癌，未进行其他分类。表格。按改变分类的晚期患者的临床特征。特征级）级）野生型）值中位年龄）性别女性男性种族白色的黑色的亚洲人其他抽烟从不吸烟以前的光py）前重型

中位生存时间估计，变类别进行比较。ox比例风险模型根据年龄性别吸烟状况从不吸烟以前轻度吸烟以前重度吸烟和当前吸烟）组织学腺癌鳞状癌其他）以及同时发生的情况进行调整和突变以及。报告和置信区间。对具有突变的患者进行了亚分析。在病理学日期后未进行随访的患者被排除在分析之外n。在接受免疫治疗的患者亚组中检查了以无进展生存期和总体缓解率为特征的免疫治疗反应。定义为从开始使用抑制剂到临床或放射学进展死亡或随访结束的时间，定义为从开始使用抑制剂的时间至死亡或随访结束。使用aplaneier方法和考虑左截断 的ox比例风险模型分析和，并再次根据年龄性别吸烟状况组织学以及 同时发生的和进行调整突变。最佳总体反应被定义为完全或部分反应。应用多变量逻辑回归来比较根据年龄和调整后的突变类别之间的可能性。为了评估免疫治疗是否与类或类突变患者的生存率改善相关，我们首先根据可用变量突变类别年龄性别种族吸烟状况组织学以及同时发生的和突变）。然后，在比较接受的患者与未接受的患者的时，我批量短信阿根廷们通过考虑左截断的ox比例风险模型调整了倾向评分。对于所有分析，值被认为具有统计显着性。使用raphadrism软件版本进行统计分和版本软件wwwrprojectorg；参考文献）结果基因组改变谱在通过综合下一代测序测试的患者中， n例中的例）存在改变，并鉴定出一系列改变根据基因组异常 的类型，改变被分为两组：i）“类改变”包括被视为 美国在线电子邮件列表 致癌基因融合和纯合缺失的截短突变；ii）“类改变”包括所有错义突变和其他突变。基于nco中分类的未知意义的变异。中同时存在类和类肿瘤改变被归类为类肿瘤。总共，名患者占总数的，变异）患有类变异的肿瘤，名患者占总数的，变异）患有类变异的肿瘤图））。基因组改变类别与蛋白质表达之间的关系接下来我们探讨了改变的基因组类别与蛋白质表达之间的关系。个病例有足够的组织用于分析，其中包括

件。在这肺癌患者，以独立探索肺和骨髓的基因组特征和肿瘤免疫微环境）。对于基因组分析，进行了靶向测序。我们发现高频出现在肺肿瘤）和脑肿瘤）中，这可能与脑转移事件有关；绝大多数患者在原发肿瘤和骨髓中具有病灶共享突变，证实了共同的克隆事件；和是肺和骨髓中最常见的克隆基因，表明其驱动能力。为了表征状态， 我们还对名具有配对样本的患者的细胞受体库进 行了测序，并对肿瘤浸润淋巴细胞和表达进行了免疫组织化学。通过比较，的克隆度高于肺肿瘤，表明中寡克隆细胞扩增的明显模式更强；原发肿瘤的高于oligo与突变，p）；的显着低于肺肿瘤vs，p），表明细胞毒性细胞浸润水平较低；与肺肿瘤相批量短信哥伦比亚比，显示的统计水平相当p）。我们进一步研究了与脑手术后总生存期）相关的潜在生物标志物。我们发现，较高的克隆性与治疗患者的延长相关，p），但非治疗患者的预后较差，p） 多的是的独立阳性指标。这些发现为肺癌和脑寡聚转移 供了有意义的分子和临床理解。介绍肺癌是全世 美国在线电子邮件列表 界癌症死亡的最常见原因。超过四分之一的期非小细胞肺癌患者在诊断时检测到脑转移。约的早期原发性肿瘤接受手术切除的患者被发现以的形式复发。对于，最初被诊断为，在病程中会发生脑转移。尽管有多种治疗方法，包括手术立体定向放射治疗）全脑放射治疗）全身治疗和最佳支持治疗，但超过一半的患者会在几个月内死亡，表明预后不良。随着诊断和

号码：突变型肺腺癌中的突变和抑制剂耐药性费迪南多斯·斯库利迪斯；迈克尔··戈德堡奥西德搜索网站文章版本图标版本抽象的是肺腺癌最常见的致癌驱动因素。我们之前报道过或突变定义了突变体的不同亚组。在这里，我们检查抑制剂在这些亚组中的功效。在tandpoancer队列名患者）中，和仅亚组对阻断的客观缓解 率存在显着差异）与突变以及期试验中接受纳武 单抗治疗的患者相比vsvs；）。在队列中，表现出更短的无进展时间与相比，和总体生存率；。在个中，的唯一标志物。改变对抑制剂临床结果的影响扩展到阳性非小细胞肺癌。在ras突变小鼠模型中，tkkb缺失促进了抑制剂耐药性，表明存在因果作用。台湾短信网关我们的结果表明改变是阻断主要耐药性的主要驱动因素突变的。意义：这项工作确定改变是突变肺腺癌中对轴抑制剂主要耐药的最普遍的基因组驱动因素。基因组分析可以增强表达和肿瘤突变负荷的预测效用，并促进针 克隆显性和几乎普遍的遗传变异，并匹配了不同的原发 性肿瘤样本。最近通过使用癌症相关基因组的目 美国在线电子邮件列表 标测序报告了原发肿瘤和亚洲匹配的基因组复杂性和异质性。肿瘤免疫微环境）也得到了探索。工藤等人。提出，使用基因表达测试和细胞受体β谱测序，的比西方中的原发肿瘤受到更多的免疫抑制。有必要在更多的亚洲样本中系统评估突变和免疫特征，并研究它们与原发性和的关系，包括突变克隆结构抗原产生抗原识别淋巴细胞浸润和免疫检查点状态。在这里，我们收集了个原发肿瘤和配对的肺癌同步或异时，进

标志丹妮尔··格林纳瓦特；马修·赫尔曼；马克··阿瓦德；贾斯汀··盖纳；亚历克斯··施罗克；瑞安··哈特迈尔；莎莉··特拉布科；劳里·盖伊；西拉吉··阿里；朱莉娅··埃尔文；高拉夫·辛格哈尔；杰弗里··罗斯；大卫·法布里齐奥；彼得··萨博；anhang阿里埃拉·萨森；约瑟夫·苏斯塔科夫斯基；帕特里克·维塔兹卡；罗宾· 爱德华兹；何塞··布菲尔；尼莱什·夏尔马；欧世红尼尔 佩莱德；大卫··斯皮格尔；希拉·里兹维；伊丽莎白·希门尼斯·阿吉拉尔；布雷特··卡特；杰里米·伊拉斯谟；达拉··哈尔彭尼；安德鲁··普洛德科斯基奥西德标志尼亚姆··朗；西野瑞希；沃伦··丹宁；安娜·加兰科博；海法哈姆迪塔格里德·赫兹；anongingang海梅·罗德里格斯卡短信网关文莱纳莱斯；帕梅拉··维拉洛博斯；埃德温··帕拉；内达·卡尔霍尔；莱内特··肖尔；詹妮弗··跳跃；阿奇姆··荣格布鲁斯；玛丽·米诺·肯努森；罗克珊娜·阿齐米；亚西尔··埃拉明 ；ianjunhang朱利亚··莱昂纳迪；eiiang黄国健·杰克· 李；assilikiapadimitrakopoulou；伊格纳西奥·维 美国在线电子邮件列表 斯塔巴；文森特··米勒；加勒特··弗兰普顿；杰德··沃尔乔克；爱丽丝··肖；帕西··詹内asiänne菲利普··斯蒂芬斯；查尔斯··鲁丁；威廉··吉斯；李·阿尔巴克奥西德标志约翰··海马赫奥西德标志十字标记：检查更新作者和文章信息癌症发现））：–。文章历史相关内容评论已发表：上位性致癌相互作用决定癌症对免疫治疗的敏感性相关文章已发表：本期分屏视图图标意见打开在另一个窗口中分享图标分享工具图标工具

个病理标本均为原发肿瘤的小标本活检。因此，没有足够数量的组织来通过阵列比较基因组杂交来评估三种肿瘤之间的克隆关系。通过识别基因组拷贝数的变化，该方法可以确定这三个肿瘤是否是多原发肿瘤。而且，同一部位的三个不同的病理结果表明患者的肿瘤具有高度异质性，提示临床医生应对此类患者进行基因突变检测和免疫微环境检测。基于分子病理学而非传统病理类型的恶性程度的精准肿瘤治疗方案 篮子计划），将是未来的发展方向 篮子计划首个临床试验仍在进 行中，预计试验结果将于近期公布。结论当肺部恶性肿瘤治疗无效时，应及时进行第二次活检，甚至多次活检。此外，还应进行基因突变检测和免疫微环境检测。根据我们的经验，mb可能是高异质性肿瘤组织的最佳选择。知情同意患者已提供书面知情同批量短信塞浦路斯意书，以公布病例详细信息和任何随附图像。这是一份观察性病例报告，不需要机构批准，因为该患者接受的所有治疗都是标准治疗，包括克唑替尼和派姆单抗。披露作者报告在这项工作中没有利 益冲突 非小细胞肺癌上皮和间质淋巴细胞 浸润的预后作用。临床癌症研究中心。；：。号码：科芬·霍 美国在线电子邮件列表 尼克·弗莱彻·。炎性肌纤维母细胞肿瘤：临床病理学组织学和免疫组织化学特征的比较，包括非典型和侵袭性病例中的表达。美国外科病理学杂志。；：–。doipascanooma：具有共同目标的癌症亚型。癌症发现。；：–。号码：uavoojiiu用于非小细胞肺癌的第二代和第三代抑制剂。ematolncol。；。号码：sendamuriatyine等人。肺癌肉瘤样癌的结果：监测流

排，肺中表达阳性率较高。目前，对于无法满足手术要求的患者，由于激素和化疗疗效尚不明确，治疗难度较大。anoiroyukiano将这种肿瘤命名为“oma”，它携带异常的融合基因作为必需的生长驱动力，并共享激活的基因。u等人随访了克唑替尼对名阳性患者的疗效。客观缓解率为，显示出抑制剂良好的临床疗效。该患者口服克唑替尼后反应显着，与“oma”理论一致。然而，他的只有个月。对耐药肺穿刺活检进行基因测序后  发现了突变，这是克唑替尼相关激酶区域突变的耐药机制  目前尚无单克隆抗体用于治疗的报道，预计单方向。是非小细胞肺癌的一种罕见亚型，约占所有肺部恶性肿瘤的。从组织学角度来看，的特点通常是的常批量短信巴林规成分与肉瘤样成分或异源肉瘤组织混合。是最常见的突变基因，其次是和，融合基因也有报道。retalì等报道首例重排阳性的双原发肿瘤病例，经病理证实为肺肉瘤样癌和肺腺癌。患者对常规放疗不敏感，可能与突变频率高有关，导致治疗困难预后不良。   等发现患者的值相当高，采用免疫疗法可能是治疗的新可 能性。三项大型多中心国际试验——heckate和——已经证明​​抑 美国在线电子邮件列表 制剂在突变或融合患者中的疗效低于野生型患者。–最近发表的研究发现，重排患者的过表达频率高于突变患者，尽管uvalumab仅观察到对突变患者有效，这表明他们有不同的免疫生物学。目前公认免疫检查点抑制剂对重排患者无效。然而，本例中，阳性患者接受两次免疫检查点抑制剂keytruda）治疗后，病灶明显缩小，被认为与高和丰富的细胞浸润有关。这一结果表明临床医生

的天减少剂量，每天毫克。服用泼尼松五十天后，患者出现喘息和呼吸困难。胸部显示肺部多发转移结节，右下叶阻塞性肺炎伴肺不张图）。于是，进行了第二次支气管镜检查，发现气管被右下叶基底段肿块完全堵塞。进行活检，病理显示恶性梭形细胞肿瘤，可考虑为肺肉瘤样癌）图））。：i指数约。第二代基因测序显示融合图和）。肿瘤突变负荷为bs，检测呈阴性图）。免疫胞浆检测显示细胞占核细胞总数的图）。考虑到泼尼松治疗效果不佳， 我们改为口服克唑 每天两 服用克唑替尼周后  复查胸部显示肿大的纵隔淋巴结缩小，右肺阻塞性肺炎明显好转。我们将这种情况评估为部分缓解图）。服用克唑替尼个月后，复查胸部提示纵隔肺门淋巴结较之前增大，右肺阻塞性肺炎较之前增大，呈部分肺不张图）。我们停用克唑替尼并进行了第三次活检以阐明耐药机制。病理证实为肺腺癌图）。：。肿瘤组织二代基因测序显示融合和突变批量短信卡塔尔图））。肿瘤突变负荷为bs。然而，色瑞替尼并未在中国获得批准。根据患者的病史，即具有多种肿瘤成分高肿瘤突变负荷）值和高密度细胞浸润的病史，我们给患者发放了帕博利珠单抗mg帕博利珠单抗溶于生理盐水m  半小时内静脉滴注完毕。每天静脉输注次 帕博利珠单抗 两个周期后，胸腹部显示纵隔淋巴结增大并融合图）），但 美国在线电子邮件列表 患者报告体力明显改善。考虑到肺部病变的假性进展，继续使用派姆单抗。经过四个周期的派姆单抗治疗后，患者自述体力和食欲明显改善，且无明显不适。为分时，胸部显示纵隔淋巴结明显减少图），评估为部分缓解。在此之前，患者一直在进行持续随访。图患者三处活检病理诊断结果。图胸部扫描肿瘤的演变。图融合样本的屏幕截图。讨论是一种低度恶性肿瘤。大多数具有良性行为，但也可以是局部侵袭。肺是最常见受影响的器官，发生率约为。的特点是肌纤维母细胞梭形细胞与透明质基

过的病例中。与突变不同，突变不存在性别差异，并且在白人群体中比亚洲人更常见，并且在大多数以前吸烟或现在吸烟的患者中更常见。突变患者的生物学和表型异质性阻碍了针对突变患者更有效的治疗策略的出现。鉴于特定致癌途径的激活会对基因表达产生广泛影响，癌细胞的基因组成可能通过驱动特定的免疫相关途径对免疫肿瘤微环境）产生重大影响。这可以通过诱导免疫检 查点分泌特定细胞因子或产生招募特定细胞类型的趋化因子 来实现。最近的研究表明，与相应的野生型肿瘤相比，突变表达更高水平的蛋白。因此，关突变可作为抗免疫治疗的有效预测因子。西纳塞罗等人。回顾性分析了名接受的局部晚期或转移性非鳞状患者，发现突变患者比野生型患者的总生存期）和更长，具有统计学意义。此外，非同义突变的存在与相关。董等人。发现突变的肿瘤表现出显着增批量短信科威特加的突变负荷。突变改变了一组涉及细胞周期调节复制和损伤修复的基因。公开临床试验和免疫治疗分析的前瞻性观察进一步证实，突变患者接受抑制剂治疗有显着的临床获益。目前的研究中，对名患者进行了肿瘤基因突变检测，采用多种统计分析方法套索回归逻辑回归机器学习随机森林算法）发现突变患者受益于阻 断。然而，让森等人。发现，名接受免疫治疗的晚期患者没 有表现出显着的突变或任何其他影响或率的突变。激活突 美国在线电子邮件列表 变患者可能受益于阻断的潜在机制仍不清楚。大多数研究表明突变可以增强表达，促进细胞浸润，增强肿瘤免疫原性。这归因于吸烟与突变的存在之间的关联。斯尼扎纳等人。分析了名患者，发现突变发生在的吸烟者和的从不吸烟者中，而吸烟者中最常见的>转换突变是。此外，研究发现，无论吸烟年限如何，任何吸烟史都会显着增加肺癌中发现突变的可能性。吸烟过程中烟草致癌

肿瘤细胞增殖，从而支持肿瘤生准确度指标的排名图图），以评估不同基因突变对结果影响的重要性。最重要的自变量是基因突变，位居第一。这说明基因是分类算法中最重要的基因。详细信息位于图片后面的标题中图在图查看器中打开微软幻灯片软件两个准确度指标的排名图。基因 突变是套索回归逻辑回归和机器学习随机森林算 法中最重要的变量。闭环的证据已经积累，表明基因突变是免疫疗法能否使患者持久受益的独立预测因子。有或没有突变的无进展生存曲线图显示了aplaneier方法，用于绘制基因突变与接受免疫治疗的患者无进展生存期之间的关联。可见突变组与非突变组无进批量短信柬埔寨展生存时间差异具有统计学意义））。因此，突变是患者免疫治疗长期获益的有利预测因子。详细信息位于图片后面的标题中图在图 查看器中打开微软幻灯片软件采用aplaneier法绘制有或无 基因突变的患者的无进展生存曲线图像trata，图像 美国在线电子邮件列表 ，图像。详细信息位于图片后面的标题中图在图查看器中打开微软幻灯片软件预测结果的曲线图像）。突变预测免疫疗法的长期益处根据长期获益二分类结果）是否为因变量以及突变是否作为预测因子绘制曲线，如图所示。曲线下面积为，根据近似等指数极大值原理，为最佳截止值。此时特异度为，灵敏度为。假阴性概率为，假阳性概率为，表明基因突变预测结果的能力较高。讨论特定驱动基因的遗传变化激活肿瘤细胞增殖以支持肿瘤生长。研究表明，某些致癌途径也会影响免疫系统对肿瘤的识别，尤其

n使用聚合酶试剂盒gilent测序和文库构建平台高，提示携带这些基因突变的患者可能受益来自免疫疗法。组换相发生森林算法来寻找重要基因进行比较逻辑回归分析的结果。预测模型的建立基于患者的长期获益是否是因变量，基因突变是否是自变量。使用窗口绘制多维尺度），如图所示，个样本蓝点）和个样本红点）被分为两个不同的类别。 使用软件中的andomorest包对数据进行随机森林分类 。为了防止过拟合，选择一部分数据作为训练集批量短信尼泊尔，另一部分样本作为测试集。这样做的目的是为了）以及森林数量与误差之间的关系图）。详细信息位于图片后面的标题中图在图查看器中打开微软幻灯片软件多维尺度。详细信息位于图片后面的标题中图在图查看器中打开微软幻灯片软件参数与误差之间的关系。详细信息位于图片后面的标题中图在图查看器中打开微软幻灯片软件森林数量与误差之间的关系。 从两张图可以看出，当树的数量达到多棵时，错误率逐渐 趋于稳定。最优参数为mtry和ntree。袋外）估计 美国在线电子邮件列表 错误率为，相当于交叉验证分类准确率为，而原始样本回生预测准确率。这表明本研究的预测因子与免疫检查点抑制剂治疗的长期益处之间存在稳定的相关性。当上述参数mtry，ntree）固定时，计算每个基因突变的平均最小基尼指数降低eanecreaseini）和平均准确率降低eanecreaseccuracy）。这样做的目的是获得两个

能是一种不利于免疫治疗的类型。值得注意的是，突变突变组合突变组合突变仅发生在患者中，提示这四种基因突变可能是有效免疫治疗的潜在基因。突变突变和组的突变发生率较高，但由于样本量的原因，未显示出统计学差异，这表明如果将这些基因突变用于免疫治疗，疗效较差，需要进一步探索。表可能性与肿瘤特异性基因突变之间的关联基因新开发银行n）德意志银行n值泛rb克拉斯乳腺癌号号k梅特 成纤维细胞生长因子布拉夫极波尔多黑土克拉斯粗体字体表 示值，表明有统计学意义。探索免疫治疗结果的独立预测因子以长期效益为结果变量基因突变为自变量进行套索回归。使用软件中的glmnet包。当使批量短信马来西亚用惩罚参数lambdalambdase时，模型的误差相对较小。此时，模型中保留的非零基因突变表，图ab）为和。其中，排名>>>是按照重要性进行的。表个自变量系数基因系数截距）−泛rb克拉斯乳腺癌梅特成纤维细胞生长因子布拉夫极波尔多黑土克拉斯详细信息位于图片后面的标题中图在 图查看器中打开微软幻灯片软件a个自变量的asso系数曲线 ；blogambda序列系数分布。多因素分析中，将 美国在线电子邮件列表 突变和突变纳入ogistic回归由于样本量限制），结果显示突变具有统计学意义表，）。有人认为，基因的突变是免疫治疗长期获益的独立预测因素。组合突变与长期获益结果之间不存在显着的统计相关性。表ogistic回归分析结果估计标准。错误值截距）−克拉斯从逻辑回归中经常得到不可靠的结论。因此，虽然逻辑回归表明基因突变是能否获得长期获益的独立预测因子，但为了形成证据闭环，采用了机器学习的随机

量控制处理；ii使用eneead组织试剂盒对福尔马林固定石蜡包埋样品进行提取；iii从外周血样本中分离血浆和白细胞；iv从外周血中提取游离：使用iure循环试剂盒提取游离；v采用血液细胞组织基因组提取试剂盒提取白细胞种系；vi使用iosystemsyperlusits建立文库；vii使用yperapargetnrichmentit和eqaprobes对个基因panel附录）进行探针杂交；viii使用安捷伦探针和相关试剂盒进行全外显子探针杂交；i x混合并稀释不同的文库，使所有文库中的浓度为n，系 统总体积为μ；x使用lluminaieqen高通量测序平台进行在线测序。系统总体积为μ；x使用lluminaieqen高通量测序平台进行在线测序。伊拉克短信网关系统总体积为μ；x使用lluminaieqen高通量测序平台进行在线测序。统计分析使用描述性分析来总结遗传特征。isher精确检验用于研究突变与之间的关联。以为结果变量，以特定基因突变为自变量进行套索回归逻辑回归和机器学习随机森林分析，以探索与免疫治疗长期获益相关的独立预测因子。采用aplaneier法绘制有或无特定基因突变的免疫治疗患者的无进展生存曲线。绘制受试者工作特征）曲线来评估预测能力。结果肿瘤突变 基因特征这项前瞻性研究纳入了名接受单克隆抗体治疗的 晚期患者，以及名最终能够提供足够组织样本用 美国在线电子邮件列表 于基因组检测的患者。在这名患者中，的患者接受了派姆单抗治疗，的患者接受了辛迪利珠单抗治疗，的患者接受了纳武单抗治疗。的客观缓解率）为，疾病控制率）为。组占患者的，组占。选择前个基因突变进行统计分析。突变率分别为不含）和。特定肿瘤基因突变与可能性的关系表显示了可能性与分子特征之间的相关性。卡方检验结果显示，突变）组合突变）组合突变）突变）频率差异有统计学意义。突变突变突变组和组之间存在泛rb突变）。组突变组合突变组合突变突变突变突变和突变的发生率较

长。研究表明，统对肿瘤的识别，尤其是细胞介导的识别。吸烟相关的突变是中最常见的致癌变化。最近的临床证据表明，分类为的肿瘤具有免疫原性表型，并且可能对纳武单抗更敏感。本研究检测了名接受抗程序性死亡单克隆抗体包括派姆单抗纳武单抗和信迪利单抗）治疗的名中国患者的病理组织中的肿瘤突变基因，以确定与免疫检查点抑制剂临床获益相关的基因变化s）。该研究的目标是准确选择将从免 疫疗法中受益的人群 方法患者对年月至年月就诊于北京协 和医院并指导使用抑制剂的晚期患者进行前瞻短信群发缅甸性分析。根据实体瘤疗效评价标准实体瘤疗效评价标准）版），分为完全缓解）部分缓解）疾病稳定）和疾病进展四类）。持久临床获益定义为持续超过六个月的或。六个月内出现疾病进展的患者被归类为没有持久获益）。免疫治疗开始后每六至八周测定一次疗效。特殊 情况下，可以根据患者的需要调整时间间隔。患者入组截止日 期为年月日，随访截止日期为年月日。北京协和 美国在线电子邮件列表 医院伦理委员会已批准本研究，符合赫尔辛基宣言的伦理原则。所有患者均签署知情同意书。样品采集免疫治疗前采集新鲜组织样本检测基因突变，或使用抑制剂治疗前两年内获得的肿瘤组织病理白切片。需要注意肿瘤组织离体的时间；切片要求：肿瘤细胞>，面积>×mm，厚度~μm，片及以上。主要实验试剂及仪器组织基因组提取试剂盒

长。研究表明，某些致肿瘤的识别，尤其是细胞介导的识别。吸烟相关的突变是中最常见的致癌变化。最近的临床证据表明，分类为的肿瘤具有免疫原性表型，并且可能对纳武单抗更敏感。本研究检测了名接受抗程序性死亡单克隆抗体包括派姆单抗纳武单抗和信迪利单抗）治疗的名中国患者的病理组织中的肿瘤突变基因，以确定与免疫检查点抑制剂临床获益相关的基因变化s）。该研究的目标是准确选择将从免 疫疗法中受益的人 方法患者对年月至年月就诊于北京协 和医院并指导使用抑制剂的晚期患者进行前瞻性分析。根据实体瘤疗效评价标准实体瘤疗效评价标准）版），分为完全缓解）部分缓解）疾病批量短信泰国稳定）和疾病进展四类）。持久临床获益定义为持续超过六个月的或。六个月内出现疾病进展的患者被归类为没有持久获益）。免疫治疗开始后每六至八周测定一次疗效。特殊 情况下，可以根据患者的需要调整时间间隔。患者入组截止日 期为年月日，随访截止日期为年月日。北京协和 美国在线电子邮件列表 医院伦理委员会已批准本研究，符合赫尔辛基宣言的伦理原则。所有患者均签署知情同意书。样品采集免疫治疗前采集新鲜组织样本检测基因突变，或使用抑制剂治疗前两年内获得的肿瘤组织病理白切片。需要注意肿瘤组织离体的时间；切片要求：肿瘤细胞>，面积>×mm，厚度~μm，片及以上。主要实验试剂及仪器组织基因组提取试剂盒

性和中指标的比较。同步或异时转移患者各亚组肺肿瘤受靶向治疗，我们将患者分为n，％）和非n））小组进一步评临蛋白质与不良预后相关。是染色质重塑复合体的成员，在基因调控细胞谱系规范和有机体发育中发挥重要作用。是一种染色质调节基因，与胰腺癌生存率的提高相关。此外，亚克隆和同步在肺部肿瘤结果共对例患者进行病理组织肿瘤突变基因检测；集团 家，集团家 特异性基因突变发生在不含卡方 检验结果显示，等种突变的组和组之间差异有统计学意义。ogistic回归显示突变具有统计学意义）。平均下降基尼系数的随机森林分类和平均下降精度这两个准确性指批量短信土耳其标评估了不同基因突变对结果影响的重要性。在两种不同的衡量标准下，变量都是突变。有人认为，基因的突变是免疫治疗长期获益的独立预测因素。结论肿瘤组织中基因的突变是免疫治疗长期获益的独立预测因素，且预测能 力较好。介绍非小细胞肺癌占诊断肺癌的。约的非小细胞 肺癌患者在确诊时已处于期，其五年生存率低于 美国在线电子邮件列表 。体的免疫检查点抑制剂s的出现显着改变了局部晚期和晚期的治疗和管理。多项随机对照试验表明，s作为晚期患者的二线治疗优于多西他赛。已获得美国食品和药物管理局批准用于治疗种不同癌症类型的患者。然而，大多数肿瘤似乎缺乏细胞浸润和免疫基因的活跃表达。只有的晚期患者从治疗中受益，而高达的患者会出现与治疗相关的不良事件。考虑到该药物成本高昂受益人群有限以及可能出现严重副作用，探索生物标志物以选择可能受益于治疗的晚期患者非常重要。最近的研

中富集表明肺癌与同步风险的关系。尽管我们没有观察到这些基因对我们队列中的生存有影响，但在大规模研究中它可能不会被忽视。值得注意的是，是该队列中肺和脑共享且相对最常见的基因之一。锌指同源盒）首先被鉴定为甲胎蛋白基因的抑制这表明脑肿瘤中的 特异性细胞扩增可能对突变型的反应起 积极作用，但在其他情况下则起消极作用。一个限制是由于无法获得，样本量较小。因此，需要进行大规模研究来进一步证实这一观察结果。总之，可能与肺癌批量短信菲律宾的相关。与肺肿瘤相比，中丰度较低，克隆性较高。突变和克隆水平是寡转移性脑肿瘤手术预后分层的潜在因素。背景免疫检查点抑制剂s）极大地改善了非小细胞肺癌）患者的预后和整体管理，但从长远来看，只有不到的患者从s治疗中受益。因此，有必要通过生物标志物来指导免 疫治疗人群的选择，以最大限度地提高患者的获益。本文 主要探讨人群中免因特征之间的关系。方法这是 美国在线电子邮件列表 对年月至年月就诊于北京协和医院呼吸内科并被指导使用抑制剂的晚期患者的前瞻性分析。随访截止日期为年月日。对肿瘤病理组织进行肿瘤突变基因检测，并根据对患者进行疗效评价。将患者分为持久受益组）和非可持续受益组）。用作结果变量。使用各种统计方法来探索与免疫治疗相关的长期获益的独立预测因子，并为相关预测因子绘制无进展生存曲线。

因子，并且是多种癌症的肿瘤抑制因子。与数据中没有转移的情况相比，在有的肺癌和乳腺癌中富。南宫等人。报道称抑制肿瘤细胞中的表达可降低患者n的生存率。相应地，在我们的队列中，携带突变并接受的具有较高的死亡风险。这些结果提供了和关系 以及突变患者更差结果的证据 们描述了脑肿瘤与肺癌相 比的不同且相关的时间特征。在此总人群中，中的丰度低于肺肿瘤，而克隆度较高，表明血淋巴细胞浸润，但仍有可能中寡克隆细胞的扩增。有效的细胞反应涉及特定抗原反应性细胞克隆的激活和扩增。研究报告称，在未接受过免疫治疗的黑色素瘤患者中，细胞克隆性增加与抗反应相关，而更多克隆性细胞库可预测黑色素瘤对阻断的反应。此外，与肺肿瘤相比日本短信网关相当的水平为接受免疫检查点抑制剂s治疗提供了脑部病变的分子基础，尽管这取决于可以突破的药物的出现。这些结果和研究表明，对于肺肿瘤和脑肿瘤中具有支持使用的生物 标志物的患者，在脑肿瘤切除后，使用进行全身治疗可能会带 来益处。手术切除寡转移性脑肿瘤是一种候选 美国在线电子邮件列表 治疗方法。手术切除脑转移可以立即消除危及生命或产生症状的占位效应，并消除灶周水肿的根源。脑部手术预后的分子标记仍未得到满足。在我们的队列中，对于接受治疗的突变或未接受治疗的肺癌患者，脑肿瘤中较高的水平具有延长的，表明水平是一个强有力的预后因素。我们发现中的克隆性较高在未接受治疗的肺癌患者中，接受治疗但克隆性较低的突变自脑肿瘤切除后具有延长的。  

床和分子因素。在组中，患者突变较高的hannon指数以及肺肿瘤和之间较高的预后较差，明延长和风险比较低图）。在非组中，克隆性和s是唯一对患者分层具有统计学意义的两个指标图）。我们发现，克隆性较高的患者显示出预后较差的指标，这与组中观察到的情况相反，而具有一致的趋势。图：预后分子因素分析。图和显示所有患者接受靶向治疗的患者组）和未接受靶向治疗的患者非组）的生存分析结果。 所有分子特征分为两类二分法和连续法：性别男性女性）病 理学其他）转移类型同步异时）治疗使用非）阳性阴性）阳性阴性）阳性阴性）阳性阴性）阳性阴性）和阳性阴性）进行aplaneier生存分析。对于连续因批量短信孟加拉国子，进行最大选择的排名统计来计算最佳截止值。这些因素根据截止点分为较高组和较低组。危险比）是按照高组与低组的比较计算的。全尺寸图像讨论是肺癌最常见的转移之一，预后较差。在本研究中，我们收集了匹配的原发性肺转移瘤和脑转移瘤的肿瘤样本，以对基因组图谱库和表达进行综合分析。该队列中纳入的一系列肺癌亚型包括和）代表了研究的病理学全面性。我们在分子和表型水平以及它们之间 的相互作用上进行了有意义的探索。我们检查了成对的肺肿瘤 和脑肿瘤中的反复突变和进化遗传事件。共同的改变 美国在线电子邮件列表 从基因组水平证实了它们的克隆关系。原发性肿瘤和脑肿瘤中具有最高的克隆突变表明在进化过程中优势地位的保留，而不一致的突变表明肿瘤克隆发生了遗传选择事件。事实上，独立的遗传事件通常发生在肺和脑中，导致基因组异质性。肺中的发生率增加以及和可能是代表。的较高表达据报道，肺癌患者组织样本中的

的克隆进化。在所有个配对样本中，个至少有一个共享突变中位数，范围），表明原发肿瘤和中存在共同的遗传克隆事件。唯一未发现共有突变的患者是患者。九个在原发性肿瘤和中具有最高癌细胞分数的突变簇中包含的共享突变，被认为是克隆性的。例在原发肿瘤或中具有与不一致的共同突变图）。和是原发性肿瘤中最常见的克隆基因，占所有患者的和的。在中，和同样是最普遍的克隆基因。 和突变在肺肿瘤和脑转移中均为亚克隆图 图：每位患有配对肿 瘤的患者的突变图。图每个点颜色显示患者中相同的基因ylone簇。轴和轴是癌细胞分数。全尺寸图像肺肿瘤和的特征比较克隆性hannon指数以及肺肿瘤和脑肿瘤中短信网关斯洛文尼亚前个克隆，并分析肺肿瘤和脑肿瘤之间共有的细胞克隆。的克隆性高于配对的原发肿瘤ilcoxon配对检验，p）图），而前个克隆的hannon指数或频率累积没有显示差异分别为p和p）图）。我们注意到，与肺肿瘤相比，超过一半的患者在中表现出克隆性增加）和香农指数降低）图 。 在肺肿瘤和脑转移中分别鉴定出中位数为个从到个）和个 从到个）的独特细胞克隆。所有患者都有共 美国在线电子邮件列表 享克隆中位数个，范围），大多数）在原发肿瘤和中都具有共享克隆，作为前个克隆的一部分图）。肺肿瘤和脑肿瘤之间的orisitaorn相似指数）的中值为e−至）。图：与原发性肺肿瘤相比，的克隆性更高。图箱线图和分别显示肺和在克隆性香农指数和前个细胞克隆的频率累积方面的差异。和显示了异时组中肺和之间的克隆性hannon指数和前个克隆的频率累积差异。显示同步组肺和前个克隆的克隆性hannon指数和频率累积的差异。使用ilcoxon配对检验进行统计分析。全尺寸图像接下来我们研究了转移类

统计比较，（indels）。巴纳吉等人，斯特兰斯基等人，）（。个病例的外显子区域包含,个体细胞变异，对应于中位数个突变/b和平均值个突变/b（范围：）。其中包括,个错义、,个沉默、,个无义、,个剪接位点、,个缺失、个插入和,个其他突变（主要位于’和’非翻译区）。在,个插入缺失中，个位于读框内，,个预计会导致移码，个发生在剪接位点，,个被其他分类。通过交叉比较和从个病例中使用两种数 据类型检测到的编码突变来验证突变调用 们验证了 在相应肿瘤样本中足够有力的位点鉴定的个插入缺失中的和,个替换中的。批量短信卡塔尔在反向分析中，我们在相应肿瘤样本中的足够功率位点验证了来自的个插入缺失中的和,个替换中的（图、表和扩展实验程序）。为了验证仅具有数据的病例的突变，我们随机选择了个候选突变进行超深（>,倍）靶向重测序。个插入缺失事件中的个（）和个替换事件中的个（）确认了体细胞状态（表。这些验证率通常达到或超过类似测序研究中报告的验证率（巴纳吉等 人，伯杰等人，格林格等人，尼古拉耶夫等人，斯特兰斯 基等人，癌症基因组图谱研究网络，otoki等人，张等，）。图缩略图 美国在线电子邮件列表 igs图替换调用的与交叉验证，与图相关显示完整标题查看大图图浏览器下载高分辨率图像下载（）肺腺癌诱变剂暴露的体细胞遗传特征与之前的研究一致（丁等人，坎等人，张等，,）、估算的从不/轻度吸烟者状态（×）以及谱簇中的成员资格（p）。、、和突变与谱簇和推算的从不/轻度吸烟状态显着反相关p。这些发现与报道的关联一致（科伊武宁等人，鲍等人，,鲍等人，斯莱博斯等人，）。此外，突变在谱簇中显着减少p×，并与突变同时发生p。驱动程序改变（包括突变和拷

床和组织病理学注释、序列特征和主要变异。表临床特征总结手术年龄（中位数；范围）–性别男性女性吸烟状况（第版）从不吸烟者吸烟者>年吸烟者≤年号不适用包装年份（中位数；范围）–生存后续行动可用无法跟进以月为单位（中位数；范围）–肿瘤阶段我二三、四号不适用例肺腺癌病例中选定临床变量的分布。在新选项卡中打开表格突变检测和验证我们结合全外显子组测序或全基因组测序检查了个肺腺癌肿瘤/正常对：个、个和、以及个仅。外显子组在b的目标序列上测序，中值折叠覆盖率为（范围：）（费希尔等人，）。 基因组测序的中位覆盖度在肿瘤中为（范围 在正常 中为（范围：），较高的肿瘤覆盖度是为了调整基质污染。使用对互补阵列分析来检测全基因组体细胞拷贝数变化。有关更多详细信息，请参阅表和扩展实验程序。表全基因组和全外显子组测序统计统计全外显子组捕获批量短信土耳其全基因组肿瘤/正常对测序总肿瘤b测序,,肿瘤靶点覆盖中值倍数（范围）––中位正常倍数目标覆盖范围（范围）––目标区域中每b的中位体细胞突变率（范围）（–）（–）每个患者的编码突变中位数（范围）–,–,每个患者的 非同义突变中位数（范围） 个患者转录非编码突变的 中位数（范围）–,,,–,结构重组总数不适用,保框基因重排总数不适用 美国在线电子邮件列表 废除框架的基因重排总数外显子区域（范围）供电的基因中位数数量,,–,,,–,外显子区域（范围）供电的基因中位数数量,,–,,,–,个和病例的选定测序统计数据。“肿瘤目标区域”是指（以下报告的外显子捕获诱饵组所针对的外显子区域）费希尔等人，）并在本研究中使用。“全外显子组捕获”栏不包含和分析的个病例的数据。在新选项卡中打开表格我们使用针对间质污染的癌

治疗。先前努力包括基于阵列的拷贝数变化分析（田中等人，威尔等人，），候选蛋白质编码基因的靶向测序（丁等人，坎等人，），以及单个肿瘤/正常对的全基因组测序（鞠等，李等人，）。这些研究鉴定了的体细胞局灶性扩增、已知癌基因和抑癌基因的替换和拷贝数改变，以及和的反复框内融合。这些研究还提名了几种假定的具有体细胞突变的癌症基因（家族、家族、、、和），但许多改变的功能后果尚不清楚。 最近的一项研究描述了种肺腺癌的全外显子组测 序（刘等人，）列举了几个突变基因，但没有识别出在所研究的肿瘤中经历突变正向选择的基因。在这项研究中，我们使用新一代测序技术对例肺腺癌的外显子组和/或基因组进行了测序，并匹配了正批量短信菲律宾常的邻近组织对。除了在之前的肺腺癌研究中验证具有频繁体细胞改变的基因之外，我们还发现了具有选择统计证据且可能有助于发病机制的新突变基因。总之，这些数据代表了肺腺癌体细胞改变综合注释的重大进展。结果患者队列描述我 们使用双端大规模并行测序技术对个肺腺癌的进行了测 序，并匹配了正常组织（本特利等人，）。该队列包括名从不吸烟者 美国在线电子邮件列表 、名轻度吸烟者（定义为吸烟年数少于包）、名重度吸烟者（吸烟年数超过包）和名吸烟状况未知的患者（表）。该队列包括例期、例期、例期和例期肺腺癌病例，以及例分期未知的患者。所有肿瘤均为未接受过化疗的初次切除标本，除了一个具有全基因组序列数据的病例，该病例是来自从不吸烟者的化疗后转移性肿瘤。扩展实验程序中提供了样品采集的详细信息。

并确定了先前报道的肺腺癌中显着突变的大多数基因。此外，我们还发现了剪接因子基因中统计上复发的体细胞突变以及影响和的截短突变。对核苷酸背景特异性突变特征的分析将样本集分为不同的簇，这些簇与吸烟史和报告的肺腺癌基因的改变相关。全基因组序列分析揭示了频繁的结构重排，包括和激酶内的框内外显子改变。本研究中确定的候选基因是肺腺癌生物学表征和治疗靶向的有吸引力的靶标。图形概 要图缩略图fx查看大图图浏览器下载高分辨率图像下载  ）强调例肺腺癌体细胞改变的外显子组和基因组特征、和属于新发现的反复突变基因结构变异包括激活的框内融合表观遗传和失调被认为是肺腺癌的潜在标志介绍肺癌是全球主要死亡原因批量短信香港，每年导致超过万人死亡，其中以上是肺腺癌（世界卫生组织，特拉维斯，）。大多数情况下，肿瘤被发现为局部晚期或转移性疾病，尽管分子诊断和靶向治疗有所改进，但肺腺癌的平均年生存率约为（明娜和席勒，）。分子基因分型现在常规用于指 导肺腺癌患者的临床护理，这主要是由于临床试验证明 ，与标准化疗相比，靶向激酶抑制剂对于突变或融合患者的疗效更佳 美国在线电子邮件列表 。郭等人，鲍和赫米莱茨基，）。除了约的美国病例中发现和改变外，肺腺癌还经常存在、、和的激活突变或和的易位。鲍和哈钦森，），所有这些都被作为正在进行的临床试验的目标。肺腺癌还经常存在肿瘤抑制基因、、、、、和的功能丧失突变和缺失。丁等人，坎等人，桑切斯塞斯佩德斯等人，）。不幸的是，这种改变很难用于治疗。

中的整个转录组、整个外显子集合或整个基因组进行全面重测序来扩展。此类研究应该可以通过下一代测序技术实现，目前正在该计划中进行原型设计。方法总结源是从原发性肺腺癌肿瘤和邻近正常组织（或外周血淋巴细胞）中提取的。所有组织样本的收集和使用均得到参与机构的人类受试者机构审查委员会的批准。这些样本经过快速冷冻、匿名处理，并与匹配的正常样本一起由达纳法伯癌症研究所、安德森 癌症中心、纪念斯隆凯特琳癌症中心、密歇根大学和圣路易斯 华盛顿大学提供。ffymetrixty阵列数据用于估计基质污染水平，从而选择个肿瘤和匹配的正常人进行重测序研究。在测序前使用iageng服务进行全基因组扩增。对所有肿瘤的个靶基因的所有编码外显子和剪接印度群发短信位点序列进行扩增并在两条链上进行测序。生成额外的数据，直到超过的目标外显子和剪接位点碱基被至少一个序列读取覆盖。自动处理痕迹以识别和插入缺失。从各种平台获取匹配正常值的序列数据，以确定新变体和未经验证的db的体 细胞状态 使用正交技术生成进一步的数据来验证候选体 细胞突变。在个基因中鉴定出的同义体细胞突变用于估计背景突变 美国在线电子邮件列表 率，该背景突变率用于统计计算以识别显着突变的基因。统计方法用于识别显着突变的途径。使用ffymetrixlusenehip确定了个肿瘤的表达谱。进行进一步分析以确定突变与拷贝数变异、突变与基因表达、拷贝数变异与基因表达以及突变与临床属性之间的相关性。肺腺癌是非小细胞肺癌最常见的亚型，每年导致全球超过万人死亡。在这里，我们报告了个肺腺癌肿瘤/正常对

在中观察到的一个突的高度保守位置，这是新描述的“分子制动器”的一部分总的来说，我们在测序的个肝配蛋白受体中的个中鉴定出了个突变，发现几个家族成员的突变率很高（图和图）。先前对酪氨酸激酶结构域的突变筛查在种大细胞神经内分泌癌中发现了个突变，但在种非小细胞肺癌中未发现突变。相比之下，我们发现中有个突变（图），其中个突变发生在其酪氨酸激酶结构域内，这表明的作用不仅限于大细胞神经内分泌癌。和家族成员中也发现了大量突变。 尽管各个肿瘤之间的突变率差 异很大。我们发现肿瘤分期与、、和突变之间存在显着相大量短信爱尔兰关性。根据世界卫生组织标准、，肺腺癌有几个亚类，包括腺泡癌、乳头状癌、（细支气管肺泡癌）和实体癌。我们最值得注意的发现是，、和突变与腺泡、乳头状和亚型呈不同程度的负相关，但与实性亚型呈显着正相关（，×；，）,在个肿瘤中具有亚型信息。另一方面，突变与实性亚型呈中度负相关（），与乳头状亚型呈显着正相关（），与之前的报道一致。此外，我们的分析显 示，未发现突变的名患者具有不同的临床特征，并且 与有突变的样本相比，有些患者显示出相当程度的拷贝数改变（补 美国在线电子邮件列表 充表）。值得注意的是，个基因中未发现突变的个肿瘤中有个来自基质污染率较高的组（补充表），这表明基质污染可能会降低发现突变的敏感性。讨论肿瘤的分析是迄今为止最大的肿瘤类型特异性突变筛查，但它并不完全有能力检测一些已知与肺癌相关的基因。因此，需要更大的样本量。此外，这些方法应扩展到其他类型的肺癌、转移性肺癌和其他癌症，以确定这些疾

考文献）（图和补充表）。值得注意的是，在我们的研究中，一些已知的癌基因和抑癌基因低于显着性边界。这些基因包括原癌基因（我们在其中发现了两种突变，其中一种被描述为其他癌症中的转化突变）、、（参考文献）和以及肿瘤抑制基因。这些结果为研究突变功能域（补充方法和补充表b）以及分析突变和通路之间的相互作用提供了丰富的数据。 并发且相互排斥的突变e吸烟者的平均突变 数量显着高于从不吸烟的个体（，t检验），值得注意的是，从未吸烟者的肿瘤在重新测序的基因中没有超过个突变，而吸烟者有多达个突变（图b）。与之前的研究结果一致，我们观察到突变短信网关挪威与从未吸烟的患者状况相关（，isher精确检验），而突变与吸烟者状况相关（）。我们还观察到突变与吸烟者之间的相关性（），与之前的报告一致。正如预期的那样，较高级别的肿瘤比较低级别的肿瘤积累了更多的突变（；补充图a）。一 些基因显示体细胞突变频率随肿瘤分级明显增加 表明这些 基因可能在转化或进展中发挥作用。一个明显的例子是，级、级和级肿瘤的体细胞突变率分别为、和（相关性×），与之前的报告一致。其他突变频率与肿瘤分级呈正相关的基因有、）和（）。相反，其他基因与肿瘤分级没有显着相关性，这可能表明这 美国在线电子邮件列表 组基因的突变在肿瘤发生的早期至关重要。一个明显的例子是，级、级和级肿瘤中分别有、和发生体细胞突变。我们的分析表明，较高阶段的肿瘤比较低阶段的肿瘤积累了更多的突变（；补充图b），

新的治疗分子靶点。主要的肺癌是癌症死亡的主要原因，每年导致全球超过一百万人死亡。每年诊断出约万新病例，且预后不佳。肺腺癌是最常见的肺癌形式，平均年生存率为，主要是因为晚期检测和缺乏晚期治疗。虽然吸烟无疑是肺癌的主要原因，但大约的病例发生在从不吸烟的患者中。环境暴露和遗传易感性也被认为会增加癌症风险,,,。从未吸烟的患者的腺癌中，表皮生长因子受体基因的酪氨酸激酶结构域内经常含有突变。 这些患者通常对酪氨酸激酶抑制剂药物如吉非替尼和 厄洛替尼有反应,,,但通常会产生耐药性,。相反，突变在见，并且与酪氨酸激酶抑制剂耐药性相关、。之前的基因重测序工作已经确定了与人类癌症相关的几、d和e成员的突变显示了受体家族。使用确定蛋批量短信斯洛伐克白质结构域。结构域包括“”（受体配体结合结构域）、n（纤连蛋白型结构域）、g（免疫球蛋白结构域）、（富含亮氨酸重复结构域）、（富含亮氨酸重复氨基末端结构域）、（蛋白质酪氨酸激酶结构域）和  无菌α基序 突变的位置用菱形、圆形和三角形 表示，实心形状代表新突变，空心形状表示已知突变。形状的大小 美国在线电子邮件列表 与突变残基的保守程度成正比。每个家族的代表性方案是基于lustal比对构建的。反复发生的突变以黑色标出。oweroint幻灯片全尺寸图像肝配蛋白家族中突变最显着的基因是（图）。尽管已报道了该基因的孤立突变,，但据我们所知，这是肺腺癌中突变具有统计显着性的首次证明。的个突变沿基因长度分布，其中个突变位于胞外结构域，个突变位于激酶结构域，但没有突变聚集的热点位置。

究文章的更正 的肺癌患者中常见的突变引起的。然而，吸烟者经常患有另一种异常的鳞状细胞肺癌，目前尚无已知的分子遗传治疗靶点。现在，韦斯等人。发现了与吸烟相关的肺癌的一个新嫌疑：基因的扩增，该基因编码成纤维细胞生长因子受体酪氨酸激酶。为了确定可能影响鳞状细胞肺癌的治疗上可行的遗传改变，eiss等人。对大量肺癌样本进行基因组分析。鳞状细胞肺癌样本显示扩增，这在其他 肺癌亚型中未发现 然后，作者确定，一种广泛抑制 受体功能的分子可以阻止肿瘤生长，并导致癌症中的细胞死亡，这些癌症以依赖于表达的方式表达大量基因产物。此外，抑制导致小鼠模型中肿瘤大小显着减小肺癌扩增。这一证据表明，应该探索抑制这种受体酪氨酸激酶作为控制吸短信网关保加利亚烟者鳞状细胞肺癌的候选疗法。抽象的肺癌仍然是发达国家癌症相关死亡的主要原因之一。尽管具有突变或融合的肺腺癌分别对表皮生长因子受体和间变性淋巴瘤激酶抑制的治疗有反应，但鳞状细胞肺癌目前 缺乏治疗上可利用的基因改变。我们对个肺癌样本进 行了系统性搜索，寻找适合治疗的基因改变，然后进行了高分辨率 美国在线电子邮件列表 基因拷贝数分析。我们发现鳞状细胞肺癌中存在频繁且局部的成纤维细胞生长因子受体扩增。），但在其他肺癌亚型中没有，并且通过荧光原位杂交，证实了鳞状细胞肺癌样本的独立队列中存在扩增（占病例的）。通过在大量n肺癌细胞系中使用抑制剂进行细胞筛选，我们证明该化合物特别是在那些携带扩增的肺癌细胞中抑制生长并诱导细胞凋亡。我们通过敲低和抗性等位

泌肿瘤以及例结肠癌、例胰腺癌、例乳腺癌、例恶性间皮瘤、例肾细胞癌和例甲状腺肿瘤。组织微阵列还包括种不同的良性组织。例肺腺癌中例呈napsin阳性，而例中例甲状腺转录因子呈阳性。有个napsin阳性/甲状腺转录因子阴性和个甲状腺转录因子阳性/napsin阴性肿瘤，使至少一种标记物呈阳性的病例数增加到例（为。测试的有限数量的神经内分泌肿瘤是napsin阴性。所有鳞状细胞癌、结肠腺癌、胰腺 癌和乳腺癌以及间皮瘤的两种标志物均为阴性 在肾肿瘤 中，多数乳头状肾细胞癌、约三分之一的透明细胞肾细胞癌和一例嫌色肾细胞癌中，napsin呈阳性。在甲状腺中，只有例甲状腺乳头状癌均具有高细胞形态，napsin呈阳性，而所有其他乳头状批量短信阿曼癌和滤泡状癌均为阴性。正如预期的那样，所有肾肿瘤的甲状腺转录因子均为阴性，而除例乳头状癌外，所有甲状腺肿瘤均为甲状腺转录因子阳性。apsin是肺腺癌的敏感标志物，也在肾细胞癌的亚型中表达，特别是乳头状癌，以及罕见的甲状腺乳头状 癌病例 鳞状细胞肺癌中频繁和局灶性扩增与可治 依赖性相关乔纳森·韦斯、马丁·索斯、丹尼拉·赛德尔、马丁·佩弗、托 美国在线电子邮件列表 马斯·赞德、约翰内斯··赫克曼、罗兰··乌尔里奇、鲁皮卡·梅农、塞巴斯蒂安·迈尔，和罗曼··托马斯位作者作者信息和隶属关系科学转化医学年月日第卷第期p。ra：/scitranslmed指标下载过去个月过去个月引文过去个月过去个月肺癌确凿证据抽象的补充材料参考文献和注释电子信件信息与作者指标和引文检查访问权限参考分享这篇文章有一个更正。请参见：对题为“鳞状

术概念。世界外科杂志年第章–。谷歌学术交叉引用考研德鲁克北京,索耶斯化学发光,坎塔吉安，等人。酪氨酸激酶特异性抑制剂在费城染色体慢性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病急变期的活性。新英格兰医学杂志年第章–。谷歌学术交叉引用考研楔,奥格尔维,杜克斯中号，等人。口服后可抑制血管内皮生长因子信号传导、血管生成和肿瘤生长。癌症研究年–。谷歌学术考研卡洛马尼奥,维塔利亚诺,贵达时间，等人。 是一种口服酪氨酸激酶活性抑制剂，可有效阻断致癌激酶 。癌症研究年–。谷歌学术考研韦尔斯小，戈斯内尔乙短信网关塞尔维亚脑,盖格尔射频，等人。凡德他尼治疗转移性遗传性甲状腺髓样癌：开放标签期试验的随访结果。临床肿瘤杂志年。谷歌学术交叉引用狐狸乙,维德曼公元前,惠特科姆采购订单，等人。凡德他尼治疗儿童和青少年遗传性甲状腺髓样癌的/期试验。临床肿瘤杂志。谷歌学术交叉引用科恩电子工程,罗森,沃克斯电子工程，等人。阿西替尼是一种针对晚期甲状腺癌所有组织学亚型的积极治疗方法： 期研究结果。临床肿瘤杂志年 谷歌学术交叉引用考研 鼠尾草属右,谢尔曼,洪，等人。（一种、和激酶抑制剂）在晚期恶性 美国在线电子邮件列表 肿瘤患者（包括甲状腺髓样癌患者）中的期研究。临床肿瘤杂志年。谷歌学术交叉引用沙阿,斯卡格斯北京,布兰福德，等人。序贯激酶抑制剂疗法选择具有改变致癌效力的复合耐药突变。临床投资杂志年括肺腺癌治疗的最新进展增加了对非小细胞癌准确分型的需求。甲状腺转录因子的免疫组织化学广泛用于肺腺癌的诊断，因为它标记了大约的肺腺癌，并且在大多数鳞状细胞癌和其他器官的腺癌中

短信群发服务, 短信群发营销, 批量短信发送, 批量短信活动, 购买批量短信司）的发现对临床医学产生了深远的影响，并改变了癌症治疗的格局（）。苯胺喹唑啉凡德他尼straenecaimited选择性抑制含有激酶插入结构域的受体/血管内皮生长因子受体酪氨酸激酶活征：的新型末端。癌基因年–。谷歌学术考研林如果,多子ev年第章–。谷歌学术交叉引用考研莫利杰峰,兄弟,韦尔 究年第 谷歌学术考研兴中号,韦斯特拉,图法诺 ，等人。突变预示甲状腺乳头状癌的临床预后较差。临床内分泌代谢杂志年–。谷歌学术交叉引用考研多尼斯凯勒,斗,志，等人。原癌基因突变与和相关。胡姆·摩尔·热内特年第章–。谷歌学术交叉引用考研调度,郭氏柔佛批量短信瑞典州,希利，等人。型多发性内分泌肿瘤中原癌基因的种系突变。自然年第章第章–。谷歌学术交叉引用考研卡尔森知识管理,斗,志，等人。原癌基因酪氨酸激酶催化结构域的单错义突变与型多发性内分泌肿瘤相关。美国国家科学 院院刊年第章 学术交叉引用考研吉姆氧,沼泽,安德 鲁标清，等人。无密码子突变的型多发性内分泌肿瘤中原癌基因密码子的种系二核苷酸突变。临床内分泌代谢杂志年–。谷歌学术交叉引用考研岩下时间,村上,黑川，等人。突变导致型多发性内分泌肿瘤的二次打击模型。生物化学生物物理学研究中心年–。谷 美国在线电子邮件列表 歌学术交叉引用考研门科跳频,范德鲁伊特,德瓦尔克，等人。非典型型与同一等位基因上的两个种系突变相关，不涉及密码子。临床内分泌代谢杂志年第章–。谷歌学术交叉引用考研黄,托雷斯克鲁兹,盒标清，等人。突变体在多发性内分泌肿瘤型相关甲状腺髓样癌中的扩增和过表达。临床内分泌代谢杂志年第章–。

吉林,布罗德尔通用汽车。神经母细胞瘤、率较低。癌症研究年–。谷歌学术考研古塔斯氮,弗拉乔迪米特罗普洛斯,布卡中号,拉扎里斯交流电,纳西乌拉斯,加祖利中号。希腊甲状腺乳头状癌和髓样癌队列中的和突变。抗癌研究年–。谷歌学术考研诺尔斯聚丙烯,默里鲁斯特,克亚尔，等人。酪氨酸激酶结构域的结构和化学抑制。生物化学杂志年第章–。谷歌学术交叉引用考研格里 科中号,桑托罗中号,柏林吉耶里公吨，等人 是ret原 癌基因的一种新型重排形式，经常在人甲状腺乳头状癌体内检测到。细胞年第章–。谷歌学术交叉引用考研桑托罗中号,梅利洛,富斯科。甲状腺乳头状癌中的/激活：欧洲内分泌学杂志奖讲座。欧洲内分短信群发捷克共和国泌杂志年第章–。谷歌学术交叉引用考研柯林斯北京,基亚佩塔,施耐德，等人。儿童时期因良性疾病接受放射治疗的甲状腺乳头状癌患者中的表达。临床内分泌代谢杂志年–。谷歌学术交叉引用考研尼基福罗夫叶,罗兰杰明,博韦凯,蒙福特穆尼奥 斯,费金日本航空协会 射诱发和散发性甲状腺乳 头状癌形态变异中ret癌基因重排的独特模式。癌症研究年–。谷歌学术考研滨谷,江口,伊藤右，等人。/重排优先发生在暴露于高辐射剂量的原子弹幸存者中的乳头状甲状腺癌中。癌症研究年–。谷歌学术交叉引用考研尼基福罗娃明尼苏达州,斯金格,布拉夫 美国在线电子邮件列表 右,梅德韦多维奇中号,费金日本航空协会,尼基福罗夫叶。参与人类细胞辐射诱导重排的染色体位点的邻近性。科学年–。谷歌学术交叉引用考研木村,尼基福罗娃明尼苏达州,朱,可耐夫日本航空协会,尼基福罗夫叶,费金日本航空协会。甲状腺癌中突变的高发生率：甲状腺乳头状癌中/信号通路组成型激活的遗传证据。癌症研

 脑多巴胺能神经元神经营养因子。科学年–。谷歌学术交叉引用考研科茨鲍尔,兰佩,赫克罗斯反渗透，等人。eurturin，神经胶质细胞源性神经营养因子的亲戚。自然年第章第章–。谷歌学术交叉引用考研巴洛相对湿度,坦西,兰佩，等人。rtemin是配体家族的新成员，通过α受体复合物支持外周和中枢神经元和信号。神经元年–第章。谷歌学术交叉引用考研米尔布兰特,德索瓦热 胞中受体酪氨酸激酶et的信号传导和生物学功能 细胞 生物学杂志年第章–。谷歌学术交叉引用考研岩下时间,浅井氮,村上,松山中号,高桥中号。鉴定对于具有或突变的ret原癌基因的转化活性至关重要的酪氨酸残基。癌基因年第章–。谷歌学术考研梅纳乔广场我,科斯特右,范德斯批量短信比利时洛特是，等人。家族性甲状腺髓样癌突变体和激活通路，不依赖于胶质细胞系源性神经营养因子。癌症研究年第章–。谷歌学术交叉引用考研潘塔,恩瓦里亚库,金。甲状腺髓样癌细胞中通过粘着斑激酶的信号。外科手 术年 谷歌学术交叉引用考研博雷洛,阿尔贝蒂,阿里吉 乙，等人。et/ptc的全部致癌活性取决于酪氨酸，它是磷脂酶γ的对接位点。分子细胞生物学年–。谷歌学术交叉引用考研浅井氮,村上,岩下时间,高桥中号。et和et中酪氨酸的突变损害了它们的转化活性以及与shc接头蛋白的关联。生物化学杂志年第章–。谷歌 美国在线电子邮件列表 学术交叉引用考研阿里吉乙,博雷洛,萨里奥拉。发育和癌症中的酪氨酸激酶信号传导。细胞因子生长因子ev年第章–。谷歌学术交叉引用考研高桥中号。/信号通路与人类疾病。细胞因子生长因

新型神经营养因子。神经元年–。发性硬化症,蒂季耶夫斯基,萨尔玛中号。家族神经营养因子信号传导：四主一仆？分子细胞神经科学年–。谷歌学术交叉引用考研刘,织女星质量控制,德克尔,潘迪,沃尔比,狄克逊乙脑。致癌受体表现出不同的自磷酸化位点和底物结合特异性。生物化学杂志年第章–。谷歌学术交叉引用考研桑托罗中号,卡洛马尼奥,梅利洛,富斯科。人类癌症中受体功能障碍。细胞分子生命科学年–。 谷歌学术交叉引用考研市原中号,村云是,高桥中号。与神 经内分泌肿瘤。癌症快报年–。谷歌学术交叉引用考研舒林加杰杰,沃伊塔赫尼奥,哈根斯瓦，等人。通过激活诱导细胞转化。癌基因年–。谷歌学术交叉引用考研潘塔,杜,恩瓦里亚库有限元,金。通过直接磷批量短信荷兰酸化增殖和生存途径蛋白。外科手术年–。谷歌学术交叉引用考研恩西纳斯中号,罗森埃杰,多塞特，等人。对et敲入小鼠的分析揭示了（而非）在神经营养因子诱导的交感神经元存活中的关键作用。细胞死亡不同年–。谷歌学术交叉引用考研安 德烈奥齐,梅利洛,卡洛马尼奥，等人 激活蛋白激酶α： 控制酪氨酸激酶的负反馈机制的证据。癌基因年–。谷歌学术交叉引 美国在线电子邮件列表 用考研耆那教,恩西纳斯中号,约翰逊小，米尔布兰特。关键酪氨酸对接位点在肾脏发育中的关键和独特作用。基因开发年–。谷歌学术交叉引用考研号浅井氮,福田时间,吴，等人。et酪氨酸激酶中丝氨酸的靶向突变导致肠神经嵴细胞迁移缺陷。发展年–。谷歌学术交叉引用考研舒茨,罗萨里奥中号,格林,博克斯值,冈德尔芬格急诊科,伯希迈尔瓦。神经元支架蛋白hank介导上皮细

 实际上都是错义突变）相反，它们包括微缺失、插入、无义和错义以及剪接突变。在某些情况下，整个基因被删除。与、和综合征相关的突变通常是功能获得突变，而中发生的突变是功能丧失突变，最有可能与单倍体不足或显性负效应相关。密码子、、或（外显子）具有突变的患者很少会出现（）。功能研究表明，这些突变体的细胞表面表达低于与其他突变相关的表达，例如。因此，这四种突变一方面导致的组成型激活和细胞的持续增殖，而另一方面， 它们导致细胞膜上表达的显着减少，并导致肠神经 元的凋亡。将遗传信息转化为临床实践的最佳例子莫过于检测遗传性患者的突变。不久，在发现、和是由原癌基因突变引起后，人们清楚地知道携带突变等位基因的家庭成员可以通过直接分析来批量短信罗马尼亚检测。由于知道是患有这些综合征的患者最常见的死亡原因，并且甲状腺是一种消耗性器官，其功能可以很容易地通过口服药物甲状腺素替代，因此多个中心在型家族中启动了筛查计划通过识别亲属成员突变。如果在年轻时进行，在发展之前或仍局限 于甲状腺内，则可以安全地切除甲状腺，并且手术 具有治愈性,。尽管人们普遍认为遗传性家族成员需要进行预防性甲 美国在线电子邮件列表 状腺切除术，但甲状腺切除术的时机取决于密码子突变的位点。对于风险最高（密码子或突变）的患者，建议在很小的时候（甚至在生命的最初几个月）进行甲状腺切除术；对于风险较高（密码子、、突变）的患者，建议在岁时进行甲状腺切除术。和），以及至岁之间的高危患者（密码子、、、、或突变；参考文献、）。分子靶向治疗（）（甲磺酸伊马替尼，诺华公

 或（外显子）的突变相关。密码子，包括一些与相关的密码子，特别是、和，以及其他密码子：、和（外显子）、和（外显子）、或（外显子）。在的患者中，胞内结构域内的密码子（外显子，ethr）存在点突变。少数患者的密码子（外显子；参考文献）存在突变。已报道具有双突变aleterys和aletyrys的单患者,）。在和中，突变导致配体独立的同二聚化和组成型激酶活性，从而使成为显性癌基因。 在中，突变会激活处于单体状态的受体，导致和 其他酪氨酸磷酸化，并导致底物特异性发生变化。inpatients）。大约的散发性患者在密码子处有体细胞突变，与缺乏体细胞突变的肿瘤相比，这些肿瘤在临床上似乎更具侵袭性。在、和患者中，基因型和表型之间存在相关性批量短信波兰，无论是疾病谱的临床表现还是的临床侵袭性。事实上，几乎所有患者都会出现，而大约的和患者会出现嗜铬细胞瘤。在中，它们最常发生在患者中密码子发生突变，而密码子、或发生突变的患者则较少发生。 甲状旁腺功能亢进症仅发生在密码子、、或发生突 变的患者中。考虑到发病年龄和临床侵袭性，，患者被分为最高风 美国在线电子邮件列表 险、较高风险或高风险。密码子或突变的患者代表最高风险组，而密码子、、、、和突变的患者属于较高风险组。高风险组包括密码子、、、和突变的患者。极少数情况下，皮肤病皮肤地衣淀粉样变性和先天性疾病先天性疾病（；无神经节巨结肠）可能与相关,。先天性巨结肠是新生儿肠梗阻的最常见原因，其特征是肠道各段缺乏肠神经节。仅的家族性病例和至的散发性病例中发现了突变,。

愿帮忙做园艺工作，或者只是享受自己劳动的果实和蔬菜。 力的活动，但也很有趣。 人们去雪鞋行走在新窗口中打开 西南暗处，躺在毯子上凝视星空。 人们去 在新窗口中打开 &行走或越野滑雪。 这些是探索冬季森林的好方法。 它们炼身体和享受冬季天气的好方法。 人们去滑雪橇在新窗口中打开 西本德保险 人们去滑雪橇 做雪人。 堆雪人是一项经典的冬季活动，各个年龄段季摄影课程的人们 创建冬季自然日记。 冬季自然日记是记录冬季自然世界观察的好方法。  您可以画画写下事实 甚至收集叶子和花朵 结构表明，磷酸化和非磷酸化形式均采用结合和底物所需的相同活性激酶构象，并具有独立于和底物的预组织激活环构象。磷酸化状态（）。临床转化进展年，rieco及其同事报道，一些是由转化癌基因引起的，该基因是异源氨基末端序列重排至酪氨酸激酶结构域的结果。随后表明，这种称为/的杂合癌基因存在于大约至的中，是由双链断裂批量短信乌克兰和涉及末端部分以及启动子和编码区的错误重排引起的。来自号染色体或不同染色体）。 这些融合癌基因被发现在以前暴露于辐射的患者中特 … More 其他人联系的好地方 您可以自 →

的人都可以享受。 这乐趣的好方法。 人们堆雪人在新窗口中打开 妇女节 人们堆雪人 来一场打雪仗吧 打雪仗是锻炼身体享受乐趣的好方法与朋友或家人一起。 一定要穿暖和的衣服并保护你的眼睛！ 人们打雪仗在新窗口中打开 科学图片库 人们打雪仗 去溜冰。 滑冰是一种与大自然联系的有趣而活跃的方式。 您可以在结冰的湖 泊池塘或溜冰场上滑 人们滑冰在新窗口中打开 盖 蒂图片社 人们滑冰 去雪鞋行走或越野滑雪。 … More 是发挥创意并在雪地里享受 →

 但也很有趣。 人们去雪鞋行走在新窗口中打开 访问新罕布什尔州 人们去雪鞋行走 参观冬季节日。 许多城镇都会举办冬季节日，这是庆祝季节和享受户外活动的好方法。 参加冬季节日的人们在新窗口中打开参观冬季节日的人们 欣赏冬季野生动物。 许多动物在冬天仍然活跃，有些甚至迁徙到气候温暖的地方。 您可以通过在树林中散步参观野生动物保护区或向窗外眺望来看到这些美丽的生物。 冬天的鸟类在新窗口 中打开 活泼的宠物 冬天的鸟儿 参加冬季摄影课程。 学 习如何拍摄冬季照片是捕捉季节之美的好方法。 您可以与其他人分享您的照片并激发他们与自然的联系。 参加冬季摄影课程的人们在新窗口中打开 阿多拉玛 … More 是比步行更费力的活动 →

程。 学习如何拍摄冬季照片是捕捉季节之美的好方法。 您可以与其他人分享您的照片并激发他们与自然的联系。 参加冬季摄影课程的人们在新窗口中打开 阿多拉玛 参加冬季摄影课程的人们 创建冬季自然日记。 冬季自然日记是记录冬季自然世界观察的好方法。 您可以画画写下事实，甚至收集叶子和花朵。 人们创建冬季自然日记在新窗口中打开 顶针和树枝 人们创作冬季自然日记 我希望这些想法可以帮助您以 新颖且有意义的方式与自然建立联系，即使在冬季也是如此  个人资料图片 更多的 当然，这里还有一些通过图像与冬批量短信俄罗斯季自然联系的更多想法 冬天去雪地里散步。 在雪地里行走是一种平静而充满活力的体验。 它还可以帮助您以新的方式欣赏自然之美。 … More 人们去观星 参加冬季摄影课 →

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新窗口中打开 注册天才 人们在当地的社区花园度过时光 来一场观鸟之旅。 观鸟是了解不同类型的鸟类和观赏世界上一些最美丽的生物的好方法。 您可以在自己的后院或当地的公园或自然保护区观鸟。 进行观鸟之旅的人们在新窗口中打开 维基百科 进行观鸟之旅的人们 去观星吧 观星是观看夜空和了解恒星和行星的好方法。 你可以找一个远离城市灯光的暗处，躺在毯子上凝视星空。 人们去观星在新窗口中打开 & 人们去观星 我希望这些想法可以帮助您 以新颖且有意义的方式与自然建立联系 个人资料图片 更多的 当然，这里还有一些与自然和图像联系起来的想法 … More 人们在当地社区花园度过时光在 →

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当地湖泊钓鱼 去当地公园或自然保护区观鸟。 观鸟是了解不同类型鸟类的好方法。 您可以携带双筒望远镜和鸟类识别簿来帮助您识别所看到的鸟类。 人们在当地公园观鸟在新窗口中打开 维基百科 人们在当地公园观鸟 在你的后院观星。 观星是观看夜空和了解恒星和行星的好方法。 您可以在后院找到一个黑暗的地方，躺在毯子上凝视星空。 人们在后院观星在新窗口中打开 红鳍金枪鱼 人们在自家后院观星 这些只是帮助您入门的一些想法。 还有许多其他方式可以与大自然联系。 因此，发挥创意并找到最适合您的方法。 个人资料图片 更多的 当然，当图像增强内容时我会合并图像 这里还有 … More 开 北卡罗来纳州健康新闻 人们在 →

在您的院子或当地公园种植一棵树。 人们植树在新窗口中打开 手绘 人们植树 这些只是帮助您入门的一些想法。 还有许多其他方式可以与大自然联系。 因此，发挥创意并找到最适合您的方法。 个人资料图片 更多的 当然，这里有一些更多的想法可以帮助您开始使用图像 在您家附近的大自然中散步。 您可能会惊讶地发现门外就有如此多的自然风光。 注意你看到的树木花朵和动物。 人们在附近的大自然中散步在新窗 口中打开 远足摄影师 人们在附近的大自然中散步 花时间在你的 后院。 如果您有后院，请充分利用它！ … More 然保护环境的好方法 您可以 →

人们观鸟 观星。 观星是观看夜空和了解恒星和行星的好方法。 您可以在自己的后院或当地的公园或自然保护区观赏星空。 人们观星在新窗口中打开 时间 人们观星 为自然组织做志愿者。 有许多自然组织需要志愿者帮助完成各种任务，例如步道维护植树和动物救援。 人们为自然组织做志愿者在新窗口中打开  人们为自然组织做志愿者 这些只是帮助您入门的一些想法。 还有许多其他方式可以与大自然联系。 因此，发挥创意并找到最适合您的方法。 个人资料图片 更多的 当然，这里有一些更多的想法可以帮助您开始使用图像 参观当地的花园  园是观赏各种植物和花卉的好地方  您还可以了解 … More 鸟在新窗口中打开 电讯报 →

并帮助您发展新技能。 参加自然课程的人在新窗口中打开 项目学习树 参加自然课程的人们 阅读自然书籍和文章。 有许多关于自然的好书和文章可以帮助您更多地了解自然世界。 人们阅读自然书籍和文章在新窗口中打开 健康热线 人们阅读自然书籍和文章 看自然纪录片。 自然纪录片可以带您到遥远的地方，向您介绍令人惊叹的动物和植物。 人们观看自然纪录片在新窗口中打开 儿童世界公民 人们观看自然纪录 片 聆听大自然的声音  有许多网站和应用程序提供自然 声音，例如雨声海浪拍打声或鸟鸣声。 聆听大自然的声音可以帮助您放松和减压。 人们聆听大自然的声音在新窗口中打开 … More 教您有关自然世界的知识 →

造力和解决问题的能力。 研究表明，力和解决问题的能力。 大自然提高创造力和解决问题的能力在新窗口中打开 摇滚内容 大自然提高创造力和解决问题的能力 这些只是大自然可以为我们提供的众多好处中的一小部分。 如果您正在寻找改善健康和福祉的方法，那么花时间接触大自然是一个很好的起点。 以下是一些如何更多地接触大自然的想法 去公园散步。 人们去公园散步在新窗口中打开 嗯——《纽约时报》 人们去公园散步 在山林中徒步旅行。 人们在树林里徒步旅行在新窗口中打开 是的！ 杂志 人们在树林里徒步旅行 在海滩度过时光。 人们在海滩度过时光在新窗口中打开 美国全国广播公 … More 花时间接触大自然可以提高创造 →

帮助我们睡得更好 大自然可以增加身体活动和健身。 研究表明，居住在绿色空间较多的地区的人们更有可能进行身体活动，并且拥有更好的健康水平。 自然增加身体活动和健身在新窗口中打开 原始游戏 自然增加身体活动和健身 大自然可以降低患慢性疾病的风险。 研究表明，花时间接触大自然可以降低患心脏病中风糖尿病和肥胖等慢性疾病的风险。 自然降低慢性病风险在新窗口中打开  自然降低慢性病风险 大自然可以帮助我们与他人联 系并建立社区  研究表明，花时间接触大自然可以帮助 我们与他人建立联系并建立社区。 大自然帮助我们与他人建立联系并建立社区在新窗口中打开 掌控您的健康和福祉 – 明尼苏达大学 大自然帮助我们与他人联系并建立社区社区 大自然可以让我短信群发奥地利们感觉更有活力，并与周围的世界保持联系。 … More 正在寻找改善健康和福祉的方法 →

志上发表的一项研究发现，的社区的人们更有可能了解邻居并感受到社区意识。 人们在大自然中与他人联系在新窗口中打开 美国心理协会 人们在大自然中与他人交往 大自然可以帮助我们欣赏世界的美丽。  杂志上发表的一项研究发现，在大自然中度过时光的人更有可能欣赏美并产生敬畏感。 人们欣赏自然之美在新窗口中打开 游行 人们欣赏自然之美 大自然可以帮助我们感觉与自己的联系更加紧密。 《人格与社会心理学通报》杂志上发表的一项研究发现，花时间在大自然中的人更有可能感受到生活的目的感和意义。 人们在大自然中感受 到与自己的联系在新窗口中打开 达拉克·克罗夫特 人们在大 自然中感受到与自己的联系 这些只是大自然可以为我们提供的众多好处的几个例子。 如果您正在寻找改善健康和福祉批量短信美国的方法，那么花时间接触大自然是一个很好的起点。 个人资料图片 更多的 … More 居住在拥有更多绿色空间 →