充有胎牛血清（；ibco）和青霉素链霉素（ibco）的培养基（ifeechnologies）中。将细胞在℃、的加湿培养箱中培养。对于蛋白质印迹分析实验，细胞进行血清饥饿小时。细胞的维持方式类似，但使用的是ulbecco改良agle培养基（；ifeechnologies）。细胞被确认为、、和野生型通过扩增，然后对产物进行anger测序。细胞系已通过基因分型（；ffymetrix）进行验证，并定期检测支原体污染（ycollert；onza）。 流式细胞仪分析用含有空载体、和的逆转录病毒 转导小鼠成纤维细胞。细胞用含有空载体或–的逆转录病毒转导。将转导细胞,在荧光激活细胞分选缓冲液（、）中洗涤，并在室温下在多聚甲醛中固定分钟。为了进行透化，将细胞在皂苷缓冲液（、皂苷和）中洗涤两次，并使用抗人（；ioegend）对进行细胞内染色。使用抗和抗抗体（；ellignalingechnology）对和进行阿尔及利亚电话号码表细胞内染色。使用山羊抗兔lexaluorifeechnologies检测或的结合。在使用抗人和抗抗体（；&ystems）透化之前进行细胞外染色。使用驴抗山羊lexaluorifeechnologies检测部分的结合。随后，蛋白质印迹分析使用标 准程序进行免疫印迹以下抗体来自 、总（目录号#）、p（目录号）编号#）、总（目录号#）和p 美国在线电子邮件列表 （目录号#）。抗人获自bcam（目录号#ab），抗多克隆β获自&ystems（目录号）。肌动蛋白辣根过氧化物酶抗体购自antaruziotechnology（目录号#sc）。将抗体用/稀释并在°下孵育过夜。使用增强化学发光试剂ealthcare，用缀合的抗小鼠、抗山羊或抗兔抗体illipore检测蛋白质。集落形成测定在一层底部琼脂上，细胞以低密度悬浮于含有的顶部琼脂中，并生长天。随后，拍摄照片并使用canalyzeremnaec进行系统分析。细胞在标准条件下在含和青霉素链霉素的中培养。p逆转录病毒载体插入通
充有胎牛血清（；ibco）和青霉素链霉素（ibco）的培养基（ifeechnologies）中。将细胞在℃、的加湿培养箱中培养。对于蛋白质印迹分析实验，细胞进行血清饥饿小时。细胞的维持方式类似，但使用的是ulbecco改良agle培养基（；ifeechnologies）。细胞被确认为、、和野生型通过扩增，然后对产物进行anger测序。细胞系已通过基因分型（；ffymetrix）进行验证，并定期检测支原体污染（ycollert；onza）。
流式细胞仪分析用含有空载体、和的逆转录病毒
转导小鼠成纤维细胞。细胞用含有空载体或–的逆转录病毒转导。将转导细胞,在荧光激活细胞分选缓冲液（、）中洗涤，并在室温下在多聚甲醛中固定分钟。为了进行透化，将细胞在皂苷缓冲液（、皂苷和）中洗涤两次，并使用抗人（；ioegend）对进行细胞内染色。使用抗和抗抗体（；ellignalingechnology）对和进行阿尔及利亚电话号码表细胞内染色。使用山羊抗兔lexaluorifeechnologies检测或的结合。在使用抗人和抗抗体（；&ystems）透化之前进行细胞外染色。使用驴抗山羊lexaluorifeechnologies检测部分的结合。随后，蛋白质印迹分析使用标
准程序进行免疫印迹以下抗体来自
、总（目录号#）、p（目录号）编号#）、总（目录号#）和p 美国在线电子邮件列表 （目录号#）。抗人获自bcam（目录号#ab），抗多克隆β获自&ystems（目录号）。肌动蛋白辣根过氧化物酶抗体购自antaruziotechnology（目录号#sc）。将抗体用/稀释并在°下孵育过夜。使用增强化学发光试剂ealthcare，用缀合的抗小鼠、抗山羊或抗兔抗体illipore检测蛋白质。集落形成测定在一层底部琼脂上，细胞以低密度悬浮于含有的顶部琼脂中，并生长天。随后，拍摄照片并使用canalyzeremnaec进行系统分析。细胞在标准条件下在含和青霉素链霉素的中培养。p逆转录病毒载体插入通
