进行，所有突变均通过独立分离物的扩增得到确认。对于没有突变的药物敏感肿瘤，还从至少两个独立衍生的产物中确定了外显子和的序列。isher精确检验用于计算值。突变的功能分析。有两种编号系统。第一个表示信号序列中的起始甲硫氨酸为氨基酸。这里使用的第二个表示蛋氨酸为氨基酸。商业抗体，例如特异性抗磷酸化，使用第一个命名法。为了保持一致，我们将视为。使用uikhange定点诱变试
剂盒（tratagene；参见支持文本）将突变引入全长。所
有突变克隆都经过完全重新测序，以确保没有引入额外的突变。将c克隆到pc表达载体nvitrogen中。对于瞬时转染，使用u（ocheppliedcience）和μg质粒转染人胚胎肾细胞（六孔板中每孔×个马来西亚电话号码表细胞）。细胞在含有高葡萄糖、、ml谷氨酰胺、单位/ml青霉素和μg/ml链霉素的中在°和下生长。细胞在含有血清的培养基中进行血清饥饿。（ellignalingechnology，everly，）的使用浓度为ng/ml。细胞用不同浓度的吉非替尼或厄洛替尼处理，
分别由阿斯利康和基因泰克提供 有分析至少进行了
三个独立实验。免疫印迹。有关细胞 美国在线电子邮件列表 裂解和免疫印迹的详细信息，请参阅支持文本。使用增强化学发光mershamharmacia和以下抗体检测特定蛋白质：辣根过氧化物酶缀合的抗磷酸酪氨酸,和抗总,（ransductionaboratories）、抗肌动蛋白,igma、抗磷酸yr,ellignalingechnology、缀合的抗兔g,mershamharmacia和缀合的抗小鼠g,（罗氏应用科学）。使用estoretrippingufferierce在°下剥离印迹分钟；在重新探测之前通过重新曝光胶片来验证剥离情况。使用imagequantv进行密度测定（分子动力学）。所有分析至少进行了三个独立实验。结果突变常见于对吉非
