指定的细胞接种到孔板中×

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细胞/孔,随后使用自动细胞分析仪ountstar(上海瑞宇生物科技有限公司,中国,)每天计数细胞数。对于rd掺入,将细胞接种到孔板中培养小时。用μrdbcam处理细胞分钟,然后用固定。透化后,将细胞与rdellignalingechnology一抗和二抗hermo孵育过夜。细胞核用染色。在集落形成测定中,将指定细胞以个细胞/孔接种到孔板中,每天更换一次培养基,持续周。之后,用固定细胞并用结晶紫染色以进行图像捕获和计数。伤口愈合和跨孔检测对于伤口愈合测定,将稳定的过表达细胞和对照细胞以×个细胞/孔接种到孔板中

小时后,用ppendorf吸头刮擦贴壁细胞单层。使用去除漂浮

细胞。在指定时间点对伤口进行成像并通过image软件进行测量。对于跨孔测定,将无血清培养基中的细胞接种到趋化室orning上。将含有的培养基添加到室的底部孔中。细胞在°培养小时。用棉签小心地除去上室中未迁移的细胞,并用结晶紫对粘吉尔吉斯斯坦电子邮件列表附在下膜上的迁移细胞进行染色。用倒置显微镜测量迁移的细胞。流式细胞术分析和磺基罗丹明染色为了检测受过表达影响的周期细胞群分布,将指定细胞预先饥饿小时,然后用完全培养基再培养小时。将胰蛋白酶消化的细胞在乙醇中固定过夜,并在℃下用碘

化丙啶染色分钟,然后通过流式细胞仪进行分析。为了检测肿瘤

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细胞对卡铂治疗的敏感性,采用测定。简言之,将细胞 美国在线电子邮件列表 以×个细胞/孔接种到孔板中。培养小时后,除去并更换含有相应浓度药物的培养基。用三氯乙酸固定细胞,用洗涤并染色。使用酶标仪在nm处测量值。实时定量q和蛋白质印迹根据说明使用isolusakara从细胞中提取总。使用rimecript试剂盒akara进行逆转录。使用asttartniversalreenasterixoche进行q。人基因和βactin

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