用于固相捕获验证的双端文库

迪逊,威斯康星州),将一微克大小分级的l.

迪逊,威斯康星州),将一微克大小分级的llumina文库与imbleen阵列上合成的探针组杂交。°杂交小时后,将阵列从杂交站中取出,清洗,使用q试剂盒(iosystems,oburn,)完成llumina文库定量。q结果用于确定在lluminax的单个泳道上产生,个簇所需的文库数量。x数据的泳道。制备将基因组ng送往进行全基因组扩增,ermantown,。全基因组扩增样本μg悬浮于erminator末端修复缓冲液ucigenorp,adison,中,并在icroube×mm、带有napap管的iberovaris中片段化使用ovaris超声仪(ovaris,ncoburn,)。裂解条件为μl反应体积并在°下进行。使用两次连续的秒声学处理将参数设置为扫频模式:占空比,强度,周期/突发。

通过立即添加μl对片段进行末端修复混合

温下孵育分钟。通过向末端修复反应中添加μl(样品体积)ure珠子(gencourtioscience,everly,),使用固相可逆固定化纯化末端修复反应。珠子环境在室温下孵育分钟,使与珠子结合。然后将珠子固定在磁性颗粒收集器(;nvitrogen,卡尔斯巴德,加利福尼亚州)上中国 WhatsApp 号码列表,用μl乙醇洗涤两次,并风干分钟。通过添加μlmrislp释放片段。然后将珠子固定在磁性颗粒收集器(;nvitrogen,卡尔斯巴德,加利福尼亚州)上,用μl乙

醇洗涤两次,并风干分钟。通过添加μlmrislp释放片

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段。然后将珠子固定在磁性颗粒收集器(;nvitrogen,卡尔斯巴德,加利 美国在线电子邮件列表 福尼亚州)上,用μl乙醇洗涤两次,并风干分钟。通过添加μlmrislp释放片段。末端修复的片段在lenowexo(ewnglandiolabs,orcester,)存在下用m脱氧腺苷三磷酸加尾,°分钟。每个μl反应物与μlure珠子混合,如上所述(gencourtioscience,everly,)。在μlmrislp中洗脱。在快速连接酶缓冲液和,快速连接酶(新英格兰生物实验室,伍斯特,马萨诸塞州)存在下,按照制造商方案(lluminanc,圣地亚哥,加利福尼亚州)在°下将llumina接头连接至尾片段分钟通过ure珠纯化(如上

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